大黄(庶虫)虫丸对血瘀大鼠血小板活化及相关因子的影响研究

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目的:本实验通过给SD大鼠游泳致力竭+饥饿+注射肾上腺素造成气虚血瘀模型,观察经典方剂大黄(廑)虫丸对其P-选择素(GMP-140,P-selectin)、组织纤溶酶原激活物(t-PA)、纤溶酶原激活物抑制剂(PAI)、6-酮-前列腺素F1α(6-KetoPGF1α)、血栓素(TXB2)和血液流变学(Hemorheological)的影响。探讨大黄(廑)虫丸对实验血瘀大鼠血小板活化及相关因子的作用机制,为临床应用提供理论依据。  方法:  1、选用体重为230±10g健康清洁级雄性SD大鼠40只,适应性喂养1周后,随机分为5组,每组8只,分别是:大黄(廑)虫丸低剂量组(A组)、大黄(廑)虫丸高剂量组(B组)、空白对照组(C组)、丹参阳性药物对照组(D组)和模型组(M组)。  2、模型制备  雄性SD大鼠40只,每日称取体重。每4只大鼠一笼,除空白组外,其余各组大鼠在造模期间食量均限制到平时每笼总量的2/3。大黄(廑)虫丸低剂量组用大黄(廑)虫丸(0.7g·Kg-1·d-1)混悬液灌胃,大黄(廑)虫丸高剂量组用大黄(廑)虫丸(1.4g·Kg-1·d-1)混悬液灌胃,丹参组每日用复方丹参(1g·Kg-1·d-1)混悬液灌胃,空白对照组和模型组用生理盐水灌胃(10ml·Kg-1·d-1),连续7天。除了空白对照组大鼠不游泳外,其余各组每日在常温22℃,深50cm×50cm的水桶中游泳至力竭。日一次,连续7天,第8天除去空白对照组外,其余各组均一次性皮下注射盐酸肾上腺素注射液(0.8mg·Kg-1)制备血瘀模型。  3、实验观察  上述操作连续7天后,禁食不禁水,股动脉取血,测定P-选择素(GMP-140)、t-PA(组织纤溶酶原激活剂)、PAI(纤溶酶原激活剂抑制物)、6-酮-前列腺素F1α(6-KetoPGF1α)、血栓素(TXB2)及血液流变学。  结果:  1、大黄(廑)虫丸对血瘀大鼠P-选择素的影响  结果显示,模型组与空白对照组相比,大鼠P-选择素升高,统计学有显著性差异(P<0.01),表明成功复制血瘀大鼠模型;大黄(廑)虫丸低、高剂量组与模型组相比,大鼠P-选择素明显降低,统计学有显著性差异(P<0.01);大黄(廑)虫丸低、高剂量组之间相比,高剂量组大鼠P-选择素降低更明显,有优于低剂量组的优势,但无统计学意义(P>0.05);丹参组与空白组相比,有明显统计学意义(P<0.01);大黄(廑)虫丸低、高剂量组与空白组相比,有明显统计学差异(P<0.01);大黄(廑)虫丸低、高剂量组与丹参组相比,大黄(廑)虫丸低、高剂量组优于丹参组,统计学意义显著(P<0.01)。表明大黄(廑)虫丸可降低P-选择素水平,改善血瘀状态,并优于丹参组,且高剂量组有优于低剂量组的趋势。  2、大黄(廑)虫丸对血瘀大鼠t-PA和PAI的影响  结果显示,模型组与空白对照组相比,大鼠血浆t-PA降低,PAI升高,统计学有显著性差异(P<0.01),表明血瘀时血浆t-PA降低,PAI升高;大黄(廑)虫丸低、高剂量组与模型组相比,大鼠t-PA升高,PAI降低,统计学有显著性差异(P<0.01);大黄(廑)虫丸低、高剂量组之间相比,高剂量组没有明显的升高趋势,无统计学意义(P>0.05);丹参组与空白组相比,t-PA无统计学意义(P>0.05),PAI升高,有明显统计学意义(P<0.01);大黄(廑)虫丸低剂量组与空白组相比,PAI升高,有统计学差异(P<0.05),t-PA降低,有显著统计学意义(P<0.01);大黄(廑)虫丸高剂量组与空白组相比,PAI升高,t-PA降低,有显著统计学意义(P<0.01);大黄(廑)虫丸低、高剂量组与丹参组相比,无统计学意义(P>0.05)。表明大黄(廑)虫丸可升高t-PA,降低PAI水平,改善血瘀状态。  3、大黄(廑)虫丸对血瘀大鼠TXB2和6-KetoPGF1α的影响  结果显示,模型组与空白对照组相比,大鼠血浆TXB2升高,6-KetoPGF1α降低。6-KetoPGF1α降低,统计学有差异(P<0.05),TXB2升高趋势但无统计学意义(P>0.05),表明机体发生血瘀时6-KetoPGF1α表达减少;大黄(廑)虫丸低剂量组与模型组相比,大鼠血浆6-KetoPGF1α明显升高,统计学有差异(P<0.05),TXB2无统计学差别(P>0.05);大黄(廑)虫丸高剂量组与模型组相比,6-KetoPGF1α升高更明显,统计学有显著性差异(P<0.01),TXB2有降低趋势但是无统计学意义;大黄(廑)虫丸低、高剂量组之间相比,高剂量组6-KetoPGF1α升高更明显,优于低剂量组,且有统计学意义(P<0.05),TXB2有降低趋势但无统计学意义(P>0.05);大黄(廑)虫丸低剂量组与空白组相比,6-KetoPGF1α,无统计学差异(P>0.05),TXB2有增高趋势但无统计学意义(P>0.05);高剂量组与空白组相比,6-KetoPGF1α升高,有统计学意义(P<0.05),TXB2无统计学差别(P>0.05);丹参组和空白组对照,6-KetoPGF1α无统计学意义(P>0.05),TXB2有升高趋势但无统计学意义;大黄(廑)虫丸低剂量组与丹参组相比,TXB2和6-KetoPGF1α无明显变化,无统计学意义(P>0.05);高剂量组与丹参组相比,TXB2有降低趋势但无统计学意义(P>0.05),6-KetoPGF1α升高更明显,有统计学意义(P<0.05)。表明大黄(廑)虫丸高剂量组有降低TXB2趋势,可升高6-KetoPGF1α表达,调节6-KetoPGF1α/TXB2的平衡,且高剂量组比丹参组升高更明显。  4、大黄(廑)虫丸对血瘀大鼠血液流变学的影响  结果显示,模型组与空白对照组相比,血液流变学中全血粘度低切(Low Cut)、中切(Cut)、高切(High Cut)、红细胞变形指数(Erythrocytedeformation index EDI)、红细胞聚集指数(Erythrocyte aggregation indexEAI)、红细胞刚性指数(Erythrocyte rigidity index ERI)和红细胞电泳指数(Erythrocyte electrophoresis index EEI)均有升高趋势但无统计学差异(P>0.05);大黄(廑)虫丸低剂量组与模型组相比,上述各指标均升高,但无统计学意义(P>0.05);大黄(廑)虫丸高剂量组与模型组相比,低切、高切、红细胞变形指数和红细胞刚性指数均有降低趋势,中切、红细胞聚集指数和红细胞电泳指数均有升高趋势,均无统计学差异(P>0.05);大黄(廑)虫丸低剂量组与高剂量组相比,高剂量组对血液流变学中上述指标降低更明显,有优于低剂量组的趋势但无统计学差别(P>0.05);大黄(廑)虫丸低、高剂量组与空白组比较,上述各指标均有升高趋势,但统计学无显著性差异(P>0.05);大黄(廑)虫丸低、高剂量组与丹参组相比,上述各指标均有升高趋势,但统计学无显著性差异(P>0.05),丹参组和空白组比较,无统计学差别(P>0.05)。表明大黄(廑)虫丸高剂量组有降低血流变中低切、高切、红细胞变形指数、红细胞刚性指数的趋势。  结论:  1、大黄(廑)虫丸可通过降低P-选择素水平,抑制血小板的活化程度,延缓白细胞向血栓聚集,阻止了血瘀的发生。  2、大黄(廑)虫丸可通过升高t-PA水平和降低PAI水平,降解纤维蛋白(原)和部分凝血因子,维持凝血与纤溶系统的动态平衡,达到治疗血瘀的目的。  3、大黄(廑)虫丸可通过升高6-KetoPGF1α水平,抑制血小板聚集,调节6-KetoPGF1α/TXB2的平衡,阻止了血瘀的产生。  4、大黄(廑)虫丸高剂量组有降低血流变中指标低切、高切、红细胞变形指数、红细胞刚性指数的趋势,阻止了红细胞聚集,降低了全血粘度,从而防止了血瘀形成。
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