1,3-丙二醇是工业聚酯材料PTT的主要原材料，目前1,3-丙二醇的生产均为化学法生产。近年来，利用葡萄糖或葡萄糖转化的甘油以及其它可再生资源为原料生产1,3-丙二醇的生物转化法已成为1,3-丙二醇研究的热点。国外许多大公司对生物法产1,3-丙二醇也有了较深入的研究，并申请了多项专利，而国内对生物法生产1,3-丙二醇的研究刚刚开始，主要集中于发酵条件和菌株的传统育种上，对于基因工程改造的研究相对较少。在1,3-丙二醇的发酵生产中，研究较多的菌株包括克雷伯氏肺炎杆菌、丁酸梭状芽孢杆菌、弗氏柠檬酸杆菌等，但各大公司已对这些菌株的各项研究申请了专利权，因此国内的研究受到专利的很大限制。据文献报道，一些乳酸菌在以葡萄糖为辅助底物时，具有利用甘油产1,3-丙二醇的能力，且产量较高，因此，本论文的目的是通过分离乳酸菌，筛选产1,3-丙二醇的菌株，并对在甘油到1,3-丙二醇的转化途径中两个关键基因之一的1,3-丙二醇氧化还原酶基因(dhaT)进行克隆。为下一步进行基因工程改造奠定基础。取得研究结果如下： 1．从采自若尔盖和红原的牦牛酸奶中分离、纯化得到7株乳酸菌。通过形态特征、生理生化等实验，发现7株乳酸菌均为革兰氏阳性菌、无芽孢、兼性厌氧、接触酶阴性，HY-1，HY-3，HY-4，HY-5，HY-6为杆状，HY-2为长椭圆状，HY-7为球状；再根据精氨酸产氨，淀粉水解、明胶液化和生长条件等实验初步判定HY-1，HY-3，HY-4，HY-5，HY-6属于乳杆菌属；HY-2为链球菌属；HY-7为乳球菌属。 2．完成了7株乳酸菌的1,3-丙二醇氧化还原酶活性检测，筛选获得1株产1,3-丙二醇的乳酸菌。1,3-丙二醇氧化还原酶酶活测定采用比色法，发现仅HY-7有活性，进一步通过非变性蛋白质电泳证明Hy-7中1,3-丙二醇氧化还原酶的活性。在此基础上，通过气相色谱分析，表明阱7产1,3-丙二醇的最适pH为6.5，最适温度为30～37℃。 3．克隆获得了克雷伯氏肺炎杆菌的1,3-丙二醇氧化还原酶基因和乳酸菌HY-7的EST序列，并进行了相关的生物信息分析。在证明Hy07产1,3-丙二醇的基础上，根据已知的1,3-丙二醇氧化还原酶基因，通过序列比对分析，设计了同源引物，克隆到一段EST序列，对其进行了生物信息学分析。为进一步研究基因工程菌株奠定基础。