论文部分内容阅读
本学位论文以背角无齿蚌(Anodonta woodiana)为研究材料,在实验室条件下完成了镉(Cd2+)对背角无齿蚌主要组织器官抗氧化酶和免疫指标的检测。实验分为两部分:1.镉胁迫与清除设计了1个对照组和3个镉浓度(Cd2+,0.5、5和50 mg/L)胁迫组,进行14天镉胁迫和恢复清水饲养14天,通过对消化腺Cd2+含量、超氧化物歧化酶(SOD)、酸性磷酸酶(ACP)和碱性磷酸酶(AKP)活性和丙二醛(MDA)含量的检测,探究镉的毒性影响。结果显示:(1)消化腺。50mg/L组,Cd2+含量随着胁迫时间的延长而增加,随着清水饲养时间的延长而减少。5mg/L和50mg/L组,Cd2+含量变化与50mg/L组相比有类似趋势;在镉胁迫期,SOD活性均被极显著(P<0.01)抑制;在清水饲养期间,SOD活性在第1天仍被极显著(P<0.01)抑制,随后各浓度组均呈现先诱导后抑制现象。ACP活性在胁迫第4、7天均被显著(P<0.01)诱导,在清水饲养时期酶活性变化无明显规律,但最终与对照组无显著差异;在胁迫第4、7天,5 mg/L和50 mg/L组的AKP活性被显著(P<0.01)诱导,在第14天AKP活性均被抑制,但仅0.5 mg/L和50 mg/L有显著变化;在清水饲养时期,第4、14天,AKP活性均被显著(P<0.01)抑制;MDA含量在胁迫时期显著(P<0.01)增加,在清水饲养阶段逐渐减少,但除14天外,MDA含量仍显著(P<0.01)高于对照组。(2)鳃组织。Cd2+含量随着胁迫时间的延长而增加,随着清水饲养时间的延长而减少,但5 mg/L和50 mg/L组中Cd2+含量均极显著高于对照组;SOD活性在镉胁迫前期被极显著(P<0.01)诱导,然而在胁迫后期除50 mg/L组在第14天被显著(P<0.05)诱导外,其余均无显著变化;在清水饲养期间,SOD活性在第4天被极显著(P<0.01)诱导,随后仅有0.5 mg/L组被显著(P<0.05)抑制,其余无明显变化;在胁迫第1天,0.5 mg/L和5 mg/L组的ACP活性被极显著(P<0.01)抑制,第4天仅有0.5 mg/L组被显著(P<0.05)诱导,第7天各组均被显著(P<0.01)抑制,第14天仅5 mg/L组被显著(P<0.05)诱导;在清水饲养期间,ACP活性呈现抑制趋势,并从第7天起各浓度组被显著(P<0.05)化无明显规律;在清水饲养期间,AKP活性呈现抑制趋势,0.5 mg/L和50 mg/L抑制;在胁迫时期,除第4天AKP活性均被极显著(P<0.01)诱导外,其余变组显著被抑制;MDA含量在胁迫时期显著(P<0.05)增加,在清水饲养阶段前期含量有所减少,但是后期含量有增加趋势。2.镉与嗜水气单胞菌联合设计了1个对照组和3个镉浓度组(0.5 mg/L、5mg/L和50mg/L)进行14天镉胁迫,随后分为三组(Ⅰ:维持原生存环境;Ⅱ:注射100μl PBS;Ⅲ:注射100μl嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila),24h),检测消化腺和鳃组织中抗氧化酶(SOD、CAT、GPx和GST)、磷酸酶(ACP和AKP)以及MDA含量。结果显示:(1)在消化腺中,镉胁迫下细菌侵染造成了SOD活性显著下降,5 mg/L和50 mg/L组的CAT活性显著升高,0.5 mg/L和50mg/L组的GPx活性显著升高,GST活性显著升高,但是ACP活性无明显变化,AKP仅在5 mg/L组中有显著下降,MDA含量只有在5 mg/L组中显著下降。(2)在鳃组织中,镉胁迫下细菌侵染造成了GST活性被显著抑制,5 mg/L和50 mg/L组的SOD、CAT、GPx和ACP活性被显著抑制,0.5 mg/L和5 mg/L组的AKP活性被显著抑制,但是MDA含量无明显变化。结论:(1)镉胁迫能够诱导消化腺组织和鳃组织氧化应激水平升高,磷酸酶代谢紊乱,能间接推测出背角无齿蚌免疫系统受到严重干扰,而相同时间的清水饲养并不能使之恢复到正常水平。(2)镉对背角无齿组织中抗氧化酶活性有所干扰,但感染嗜水气单胞菌后活性仍有改变,说明组织内抗氧化酶参与杀灭细菌的过程,与此同时,重金属胁迫对磷酸酶具有组织差异,且鳃组织是一种对外界刺激敏感的器官。