目的:自60年代以来,造血干细胞移植(HSCT)在治疗血液系统恶性疾病、实体瘤及某些先天遗传性疾病等方面取得了巨大成功。目前用于临床移植的造血干细胞来源主要有三种:骨髓、外周血和脐血。脐血作为骨髓、外周血后的第三种造血干细胞的来源,以其资源优势、独特的生物学特性,可进行HLA1-3个位点不合的同胞及无关供者间的移植,移植后移植排斥(HVGR)及移植物抗宿主病(GVHD)的发生率低且程度轻,能使受者全面地重建造血及免疫功能等优点[1],正日益受到人们关注。脐血移植HVGR和GVHD发生率低、程度轻的原因和机制目前还不十分清楚[2]。由于移植免疫主要与T淋巴细胞有关,因此本题对脐血T淋巴细胞的免疫学特性进行了以下研究,对脐血干细胞移植HVGR和GVHD的部分机制进行探讨。方法:1.采用甲基纤维素半固体培养法测定脐血和成人外周血T淋巴细胞集落(CFU-TL)的产率。2.采用淋巴细胞液体培养法,即以脐血和成人外周血单个核细胞3×109/L加入含20%牛血清, 100mg/L PHA的IMDM的培养体系内培养,分别在48小时、72小时收集上清,用双抗体夹心ELISA法检测培养上清中IL-4、IFN-γ的诱生水平。3.脐血T淋巴细胞对成人T淋巴细胞的抑制实验:将男婴脐血淋巴细胞与成人女性淋巴细胞共同培养作为实验组,将成人男性淋巴细胞与成人女性淋巴细胞共同培养作为对照组。培养72小时后常规方法<WP=5>制备染色体,进行Q分带,观察具有Y染色体的核分裂象所占的百分率。结果:1.脐血CFU-TL产率为297.6±47.3/2.5×105,成人外周血CFU-TL产率为385.3±31.2/2.5×105。脐血CFU-TL的形成能力低于外周血,提示脐血的T淋巴细胞存在增生水平较低的内在缺陷,决定了其功能欠成熟,对组织配型不符的HLA抗原有一定的免疫耐受性,可能为脐血移植GVHD发生率低且程度轻的原因之一。2.脐血淋巴细胞IFN-γ、IL-4的分泌量分别为53.26±9.05、9.01±2.38,外周血淋巴细胞IFN-γ、IL-4的分泌量分别为532.39±87.42、13.94±2.99。脐血IL-4/IFN-γ比值为0.168±0.021,外周血IL-4/IFN-γ比值为0.026±0.001。脐血淋巴细胞分泌IFN-γ、IL-4的水平明显低于外周血,脐血IL-4/IFN-γ比值明显高于外周血。提示脐血的细胞免疫功能低下,与成人比较呈现Th2相对优势状态,有一定的免疫耐受能力,为脐血移植后GVHD发生低下的可能机制之一。3.将男婴脐血淋巴细胞与成人女性淋巴细胞共同培养,制备染色体,进行Q分带,发现具有Y染色体的核分裂象占81.3%,明显高于对照组50.4%,提示脐血的淋巴细胞可抑制成人淋巴细胞的有丝分裂,脐血淋巴细胞对成人淋巴细胞具有一定的抑制作用,可能为脐血移植后HVGR程度轻的原因之一。结论:1.脐血CFU-TL的形成能力低于外周血,提示脐血的T淋巴细胞存在增生水平较低的内在缺陷,决定了其功能欠成熟,对组织配型不符的HLA抗原有一定的免疫耐受性,可能为脐血移植GVHD发生率低且程度轻的机制之一。2.脐血淋巴细胞分泌细胞因子IFN-γ、IL-4的水平明显低于外周血,脐血IL-4/IFN-γ比值明显高于外周血IL-4/IFN-γ比值。提示脐血的细胞免疫功能低下,与成人比较呈现Th2相对优势状态,有一定的免疫耐受能力,为脐血移植后GVHD发生低下的可能机制之一。3.脐血淋巴细胞对成人淋巴细胞具有一定的抑制作用,可能为脐<WP=6>血移植后HVGR程度轻的原因之一。脐血来源丰富,具有独特的生物、免疫学特性,移植后HVGR及GVHD的发生率低且程度轻等优点,将使其成为非常有临床应用前景的造血干细胞的重要资源。