目的 观察凝血酶(thrombin，TB)对缺氧复氧(H／R)损伤As功能状态、凋亡发生情况的影响，进一步探讨TB加重As缺氧复氧损伤的机制及与iNOS、NO的关系。 方法 As原代培养采用DMEM培养基，不同处理后的As采用生化方法测定上清NO含量，MTT比色法测定细胞活性，流式细胞仪测定细胞凋亡率，RT-PCR方法检测iNOS mRNA，免疫细胞化学染色用于研究iNOS蛋白水平的变化。 结果 ①TB浓度在10U／ml及以下时，对未缺氧As NO产生和细胞活性没有明显影响，TB浓度增加(20U／m1、40U／m1)时刺激As产生NO增加，细胞活性下降。②TB浓度在5U／ml及以上时，刺激H／RAs产生NO增加，细胞活性下降(P<0.05)。且呈明显的剂量依赖性。③给予10U／m1的TB组H／R As与H／R组相比NO产量增多，细胞活性下降，损伤加重。且随复氧时间延长损伤加重。④H／R损伤使As NO产量增加，细胞活性下降，凋亡发生，加入TB上述变化更加显著(P<0.01)。预先加入水蛭素可抑制TB的作用。水蛭素(10U／m1)对H／RAs无明显影响(P>0.05)。⑤RT-PCR和免疫细胞化学染色显示，空白对照组细胞无iNOS表达，H／R损伤激活iNOS表达，TB刺激使H／RAs iNOS表达增加，预先加入水蛭素可抑制iNOS的表达。 结论 ①TB使As的H／R损伤加重，凋亡率增加。②上调iNOS表达使NO产生增多是TB对H／RAs作用的机制之一。③水蛭素可特异性抑制凝血酶的作用。