PHI-1基因的表达特性及功能研究

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磷酸盐诱导基因PHI-1是Sano等在烟草BY-2细胞中发现的,在磷酸盐诱导下能促成磷酸盐饥饿处理的细胞从停滞状态重新进入细胞周期。在拟南芥中,存在与烟草PHI-1相似的基因位点,但拟南芥PHI1基因的功能和表达特性尚未有清楚的阐述。  为了研究PHI-1基因的表达特性及功能,本实验利用PHI-1::GUS转基因植株的GUS表达活性观察PHI-1的组织表达特异性,发现根尖、茎尖的顶端分生组织和已经分化成熟的组织和器官中没有GUS的表达;而正在分化中的细胞、组织和器官则有明显的GUS表达,表明PHI-1可能参与细胞分化与器官发生。  本实验还利用RNA干扰技术,通过在pFGC5941质粒内含子的两端添加反向重复的PHI-1编码区保守序列片段,构建了PHI-1的RNA干扰载体,转化拟南芥得到PHI-1基因沉默的转基因株系。研究结果表明,PHI-1基因沉默的转基因株系生活周期显著延长,延缓了初生根伸长、以及抽薹、开花、荚果成熟的时间,表现为晚熟。同时,显微观察发现RNAi转基因植株的叶表皮细胞体积比野生型增大,且细胞壁有缺口,表明PHI-1在植物细胞壁形成过程中有重要作用。
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