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前列腺癌在许多西方国家是男性最常见的恶性肿瘤，占男性癌症死因的第2位。我国前列腺癌的发病率虽明显低于欧美国家，但近年随着人口老龄化及生活条件的改善，发病率有明显增加的趋势，在男性泌尿、生殖系统恶性肿瘤中发病率跃居第3位。早期前列腺癌可采取根治性手术和放射治疗，而晚期前列腺癌尚无有效疗法。内分泌治疗敏感的前列腺癌患者最终都将发展成雄激素抵抗，即对内分泌治疗无反应或内分泌治疗反而促进疾病进展，导致不可逆的临床进展恶化，并最终导致患者死亡。内分泌治疗的中位敏感期一般为18个月，仅有极少部分(约8％)患者可长期保持对内分泌治疗的敏感性。激素抵抗型前列腺癌(HRPC)是临床前列腺癌(PCa)治疗中最为棘手的问题。治疗方法主要有二线激素治疗、化疗联合激素、单用化疗、姑息性放疗等。因此，针对前列腺癌的发生、发展的机制进行研究，可以为临床前列腺癌的治疗提供更多更好的新方法。
本研究通过对前列腺癌细胞株中凋亡通路、Hedgehog通路中靶分子的研究，旨在了解晚期前列腺癌的进展的可能机制，探讨晚期前列腺癌的治疗策略。
研究内容如下：
前列腺肿瘤的发病是由于细胞增殖与凋亡的失衡所致，通过诱导细胞凋亡可控制前列腺肿瘤生长，此可成为进展期前列腺癌的有效治疗手段。诱导细胞凋亡的途径复杂，其中bcl-2家族、caspase级联、Fas途径和TGF-β信号通路等起着重要作用。本研究通过baicalin、docetaxel两种诱导剂对前列腺癌细胞株生长的抑制作用，探讨凋亡通路的作用机制。
实验结果表明，baicaI in能诱导前列腺癌细胞株DUl45凋亡，与baicaI in剂量成正相关；并通过诱导凋亡抑制细胞增殖，阻抑DUl45细胞在G1期，并与baicaI in作用时间与剂量呈正相关：电镜下可见特征性的凋亡小体：baicaIin作用于前列腺癌细胞株DUl45，48h作用后caspase-3活性较对照组明显升高；免疫组织化学染色提示bcl-2在baicaI in处理的DUl45中表达下调，Bax表达缺失，Fas表达上调。baicaIin能够诱导雄激素非依赖性前列腺癌细胞DUl45凋亡，有直接抗肿瘤的作用，可望成为前列腺癌辅助治疗的新手段。
抗微管药物docetaxeI作用于肿瘤细胞具有细胞类型特异性。本研究结果显示，doceta×eI能抑制前列腺癌细胞株PC3、DUl45的生长，两株细胞敏感性不同。从细胞周期分布情况来看，两种细胞株在docetaxeI浓度为10<-7>-10<-6>M，可致G<,2>/M期阻滞并产生凋亡。docetaxeI浓度为10<-9>-10<-8>M，产生凋亡但未出现G<,2>／M期阻滞，S期出现阻滞现象。docetaxeI(10<-8>M)作用48h后，前列腺癌细胞株PC3、DUl45均出现了明显的凋亡，较对照组明显升高。PC3细胞在药物作用后，ROS随时间变化升高不明显；而前列腺癌细胞株DUl45，ROS水平随时间变化逐渐升高。PC3细胞在药物作用后的caspase-3的活性升高不明显，随时间变化无增高的趋势。而DUl45细胞随时间变化，caspase-3的活性逐渐升高。在NADPH氧化酶抑制剂DPI预处理后，PC3、DUl45细胞的caspase-3的活性均有减少，但DUl45细胞caspase-3的活性下降更显著。可以推测docetaxe I诱导PC3产生凋亡是通过ROS非依赖通路，docetaxe I诱导DUl 45凋亡是通过或部分通过ROS依赖通路并激活caspase-3。
hedgehog信号通路在人的前列腺发育过程中起着重要的调节作用。成人干细胞和组织再生仍保持hed9ehog通路的活性。hedgehog通路不适当或不受控制的激活会导致人类肿瘤的发生。本实验通过reaItime PCR的方法检测了32例国人前列腺癌标本中不同病理分级的8例前列腺癌标本，结果显示在检测的前列腺癌标本中，均有PTCHl、GLI1基因的表达，表达水平高低不同，与前列腺癌的病理分级无相关。前列腺癌中PTCHl、GLll基因的表达，表明前列腺癌中hedgehog通路被激活。在前列腺癌中，PTCHl抗体免疫组化染色阳性，阳性率为46.8％；强阳性染色为26.6％。前列腺癌细胞间PTCHl染色强弱不等；PTCHl的表达与病理分级相关。
糖皮质激素对细胞的增殖、分化和凋亡具有重要的调节作用。糖皮质激素能够抑制多种上皮组织来源的肿瘤细胞，包括雄激素非依赖性人前列腺癌细胞，结果显示，Dex能够以时间依赖性的方式抑制PC3细胞的增殖，抑制率为35±16％(p<0.01)。定量荧光PCR检测其PTCHl，GLI1的表达，前列腺癌细胞株中PTCHl，GLl1mRNA均有显著升高。Dex作用于前列腺癌细胞株PC3细胞，在不同时间以及不同浓度，PTcHl表达均下调，而GLll的表达有不同程度的上调。
cvcIopamine一种小分子植物碱，对抗hedgehog通路中SMOH的活性，从而抑制hedgehog信号通路。本实验观察到docetaxe1 、cycIopamine均对前列腺癌细胞株PC3有抑制作用，并与药物的浓度相关。在一定的药物浓度范围内，两者具有一定的协同作用。从细胞周期分布以及早期细胞凋亡的结果来看，docetaxeI、cycIopamine均能诱导前列腺癌细胞的凋亡，两者联合用药有叠加效应。cycIopamine docetaxeI单独、两者联用能抑制前列腺癌细胞PC3的侵袭。晚期前列腺癌中hedgehog通路被激活，cycIopamine不仅能抑制前列腺癌细胞的生长，还能抑制其侵袭能力。两者联合应用可以抑制前列腺癌细胞生长和转移，为转移性前列腺癌的治疗提供了实验依据。