本文建立了烃降解微生物的富集培养装置，同时建立了一种通过高效液相色谱(HPLC)分析对硝基苯甲醇衍生物来检测短链脂肪酸的方法，并探讨了气相连用检测甲酯化长链脂肪酸浓度的可行性。 HPLC分析短链脂肪酸的方法是，通过让短链脂肪酸和对硝基苯甲醇反应生成相应苄酯，随后在：HPLC上分析，检测波长为252 nm。通过三因素三水平实验设计，得到了衍生化反应的最佳条件：衍生化反应温度为70℃，时间为2 h，硫酸浓度为0.5 mol/L。该方法的最低检出限为0.224 mmol/L，远低于气相色谱直接测定的检出限15.9 mmol/L。 在37℃和55℃两个温度下，对三个不同来源的样品进行了烃降解微生物的厌氧培养，用HPLC方法检测了培养物液相中乙酸盐的浓度，用气相色谱在培养物的气相中检测甲烷含量。37℃条件下来自上海炼油厂的菌群产气量最大，培养物顶空的甲烷浓度达到22.2 mmol/L，其次是成都沼气富集样品，达到4.17 mmol/L。但成都富集样品是唯一能在55℃下产生一定量甲烷的样品，浓度达到1.78 mmol/L。 将炼油厂样品转接到含不同浓度硫酸盐的培养基中。分别检测甲烷和乙酸的含量，通过亚甲基蓝法测定气相中硫化氢的浓度。结果表明，硫酸盐的存在有利于硫化氢的产生和乙酸的消耗，其浓度在19.72 mmol/L抑制甲烷的产出，但在2.00 mmol/L时促进甲烷的产生。 本文所建立的方法为进一步研究石油烃厌氧生物降解机制提供了支持。