【摘 要】
：
细胞分裂素(Cytokinins,CK)是经典的植物激素之一,它在植物发育、调控顶端优势和促进穗分枝的程度上起着关键作用。植物中的细胞分裂素含量与诸多代谢调控有关,细胞分裂素氧
论文部分内容阅读
细胞分裂素(Cytokinins,CK)是经典的植物激素之一,它在植物发育、调控顶端优势和促进穗分枝的程度上起着关键作用。植物中的细胞分裂素含量与诸多代谢调控有关,细胞分裂素氧化酶(Cytokinin oxidase,CKX)参与不可逆的催化反应而降解细胞分裂素,拟南芥组氨酸激酶4(Arabidopsis histidine Kinases4,AHK4)作为细胞分裂素的直接受体分子,能够快速响应细胞分裂素的信号传导。本论文构建以CKX和AHK4为识别单元的电化学生物传感器,建立细胞分裂素检测新方法,主要包括以下四个部分:1.水稻日本晴细胞分裂素氧化酶的细菌表面展示。运用冰晶核蛋白(INP)作为运载蛋白,构建了3个重组载体,以大肠杆菌作为宿主菌进行表面展示,蛋白样品经处理后进行SDS-PAGE分析。其中重组载体pET28a-INP-CKX和pET26b-INP-CKX诱导表达的蛋白以包涵体形式表达,重组载体pMAL-p2x-INP-CKX诱导表达的蛋白则成功展示于细胞表面,解决了CKX原核表达的包涵体问题。通过Western-blot分析,目的蛋白大小为116 kDa,与理论大小相同,该表达菌用于细胞分裂素生物传感器制备。2.基于细菌表面展示细胞分裂素氧化酶构建检测细胞分裂素的生物传感器。CKX辅酶FAD在热裂解石墨电极表面实现了直接电化学,氧化还原峰电位位于-0.42和-0.48V。加入细胞分裂素异戊烯腺嘌呤后,FAD氧化峰电流上升,还原峰电流下降,通过FAD还原峰电流下降值的变化实现对异戊烯腺嘌呤的检测。该生物传感器对底物专一性好,线性范围为1~9μM,线性回归方程为y=0.12x+0.8997,(R2=0.9833),检测限(LOD)为0.7μM(S/N=3)。3.拟南芥组氨酸激酶4原核表达。原核表达载体构建时融合了酿酒酵母泛素相关修饰因子(SUMO)以增加AHK4可溶性表达,构建的原核表达载体pET26b-SUMO-AHK4通过蛋白诱导和分离纯化得到有活性的融合蛋白,作为细胞分裂素检测应用的生物传感器识别单元。4.利用蛋白AHK4构建细胞分裂素生物传感器。利用牛血清白蛋白和戊二醛的强交联能力,以二茂铁为电子媒介体,实现了生物传感器的制备,它对异戊烯腺嘌呤具有较强的专一性,能避免其他植物激素的干扰。该生物传感器线性范围为3~15μM,线性回归方程为y=0.275x+0.1134,(R2=0.9848),检测限(LOD)为1μM(S/N=3)。
其他文献
论文以现代汉语频率副词“频”“频频”为对象,以北大语料库(CCL语料库)、《人民日报》及主要中文工具书等为语料,运用归纳与演绎、描写与解释相结合的研究方法,对“频”“频频”的流变,频率副词“频”“频频”的句法分布展开描写、对比,从词语生态自律性角度探讨“频”“频频”的语用动因。论文认为,实词虚化、汉语自然音步规律、汉语词语双音化趋势以及词语运用与规范生态等是“频”“频频”产生、平行运用的深层动因。
微生物是生物降解酶系的主要来源,其中聚糖水解酶系是生物质降解的主力,在生物质废料降解和资源化利用中具有应用前景。研究表明细菌和真菌来源的聚糖降解酶系在多样性和酶活
仿生悬架研究是车辆工程领域的一个前沿性课题。由于悬架不仅需要适应更多路面道路状况,对大振动、大冲击进行缓冲减振,也需要对小振动进行过滤,以提高车辆的通过极限及越野
自2013年习近平总书记提出精准扶贫以来,各级政府响应号召,开展了紧张有序的精准扶贫工作。随着精准扶贫工作推进逐渐深入,客观评价各级政府的扶贫工作成效显得尤为重要。2016年《省级党委和政府扶贫开法工作成效考核办法》中提出,精准扶贫考核数据除了来源扶贫开发系统以及全国农村贫困监测数据外,要适当引入第三方评估。在全面建成小康社会、促进农村贫困人口全面脱贫以及为乡村振兴打好基础的背景下,开展精准扶贫第
民间传统武术是民族传统武术的重要组成部分,是民族精神文化和物质文化的集中体现。云南是一个多民族的省份,除汉族外,还聚居着25个民族,其中有15个特有少数民族,10个人口较少民族。在云南25个少数民族中,每个民族有自己独具特色的武术,但随着社会的变迁,各种外来文化和竞技体育的发展给民间传统武术的发展带来了巨大的冲击,导致少数民族传统武术的保护与传承发生了变化,部分少数民族传统武术面临着被边缘化的危险
靶向脂质体作为抗肿瘤药物的载体已获得广泛的关注。其中,叶酸作为叶酸受体的靶向配体,能够使载药脂质体有选择性地进入叶酸受体高表达的肿瘤细胞。阳离子抗菌肽由于其独特的
目前,我国经济发展越来越快已然进入新常态,人们物质生活越来越丰富极大地得到了满足,但是精神生活却不像物质生活发展得那么快,人们的需求暂时还没能得到完全的满足。人们对
本文对电力现货市场进行了全面的研究。电力市场是一个复杂的系统,在该系统中,其参与者彼此交互并相互影响。本文首先介绍了国内外电力市场的发展现状,包括国内外电力市场的改革、电力市场模式的演变等。通常很难用精确的定量数学模型来描述电力市场,因此计算机和软件仿真已成为研究电力市场的主要方法之一。如何建立完善的电力市场一直是电力行业研究的重点,尤其是对交易策略的探索。本文还讨论了 RTS 24节点电力系统和
伪装(masquerade)不但常见于植物界中,在动物界中更是数见不鲜。这些伪装者能够伪装成无害、无生命的石头,鸟粪,树枝以及树叶从而去欺骗过往的天敌或者猎物。它们能够很好地
随着运载火箭、卫星、导弹等装备的高速发展,橡胶减振器作为电子仪器的保护原件在这些设备中起到的作用越来越大,且性能要求越来越高。但现阶段橡胶减振器的设计依赖经验与反复试验验证,导致设计周期长,设计投入大等问题。这些问题源于对橡胶材料的减振性能参数缺乏深入认识及灵活运用。本文通过某运载火箭上电子仪器箱所附ZN-35硅橡胶减振器的振动试验对影响橡胶减振器减振性能的因素进行研究,探索橡胶减振材料的动力学性