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目的:在大鼠脊髓损伤后的不同时间段行电针治疗,观察其对脊髓损伤后神经细胞凋亡的影响,来探讨电针治疗对脊髓神经细胞的的保护作用及其作用机制。
方法:将Sprague-Dawley雄性大鼠随机分为假手术组、模型组和电针组,采用改良Allen氏重物坠落法制成脊髓损伤模型。通过动物神经运动功能BBB评分方法评价大鼠神经损伤程度,HE染色观察脊髓组织形态学变化。采用实时荧光定量PCR技术检测HSP70和c-fos mRNA表达;使用免疫组织化学染色结合图像定量分析方法检测HSP70、c-fos、caspase-3、Fas蛋白表达。
结果:①:与模型组比较,电针组大鼠神经运动功能有改善,术后5d和7d BBB评分分值明显高于模型组,差异具有显著统计学意义(P<0.01)。②:形态学结果显示,与模型组比较,电针组损伤局部脊髓组织病理学改变减轻。③:实时荧光定量PCR结果显示,电针组与模型组HSP70 mRNA表达均在术后1d和2d增高,以后呈下降趋势,电针组HSP70 mRNA表达在术后1d和2d均高于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05);模型组c-fos mRNA表达呈现升高趋势较为明显,电针能够促进这种趋势,在术后1d和3d与模型组比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。④:免疫组织化学结合图像分析结果显示,与假手术组比较,电针组与模型组HSP70蛋白表达均在术后1d、2d和3d增高,且电针组HSP70蛋白表达量高于模型组,差异具有统计学意义(P<0.01);模型组c-fos蛋白表达升高趋势较为明显,电针促进这种趋势且在术后2d与模型组比较,差异具有统计学意义(P<0.05);电针能够抑制损伤后凋亡相关蛋白caspase-3和Fas的表达,caspase-3在术后1d、3d、5d和7d明显低于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05),Fas在术后1d、2d和7d明显低于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05)。
结论:①:电针能够改善脊髓损伤后神经运动功能。②:电针能够减轻脊髓损伤后局部脊髓组织病理学改变。③:电针能够通过促进HSP70和c-fos的表达,抑制凋亡相关蛋白caspase-3和Fas的活性而抑制神经细胞凋亡,从而促进脊髓功能恢复。