【摘 要】
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为研究乳腺癌的分子机制及利用干细胞为乳腺癌根治术后的患者进行乳腺再造,用单细胞克隆的方法从乳腺癌癌旁正常组织中分离了成人乳腺前体细胞,即具有干细胞特性的一类乳腺上
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为研究乳腺癌的分子机制及利用干细胞为乳腺癌根治术后的患者进行乳腺再造,用单细胞克隆的方法从乳腺癌癌旁正常组织中分离了成人乳腺前体细胞,即具有干细胞特性的一类乳腺上皮细胞SHEMC,该细胞在体外培养中具有分裂增殖其自身,分化为其他类型乳腺上皮细胞的能力.通过免疫组织化学及免疫印记杂交的方法检测其抗原表达,发现其表达乳腺腺泡上皮表面特异抗原和细胞角质素19.通过磷酸钙沉淀法向SHMEC细胞中转导猿病毒SV40基因,经端粒重复序列扩增法检测,细胞表达端粒酶活性,并可以多次传代而不死,获得了永生化,细胞的性质无明显改变.为了解SHMEC细胞中是否存在乳腺癌相关基因的变异,用逆转录PCR的方法检测了癌基因c-jun,c-myc的转录水平,用免疫印记杂交的方法检测癌基因,ras,CerbB-2的蛋白表达,通过PCR-微卫星分析技术,检测抑癌基因P53是否存在杂和性缺失.结果表明SHEMC细胞中不存在癌基因或抑癌基因的变异.将SHMEC细胞接种裸鼠,观察2月,无肿瘤形成,提示SHMEC即成人乳腺前体细胞无恶变的分子基础及致瘤性,可以用于乳腺再造进一步研究.
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