太行菊及近缘属野菊酚类物质的积累与抗氧化活性研究

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太行菊(Opisthopappus taihangensis(Ling)Shih为中国特有植物,在分类学上归属于菊科菊蒿亚族,与菊属、亚菊属的亲缘关系较近。其花色洁白、花期较长,植物通体富含芳香油,干后香味持久,具有很高的观赏和经济价值。太行菊常作野菊入药,产地群众反映其香气浓郁,泡茶和药用价值远优于野菊。野菊(Dendranthema indicum)为菊科菊属多年生草本植物,是传统药食兼用中药。《中国药典》述其具有清热解毒、疏风平肝之功效。酚类物质,包括绿原酸和类黄酮化合物,是野菊花的主要活性成分。现代研究表明,酚类化合物具有较强的抗氧化和清除自由基能力,可提高机体抵抗力和免疫力,预防与延缓心血管疾病、糖尿病、衰老等慢性疾病的发病率,是近年来国内外研究的热点。因此,本文系统研究不同生长时期太行菊和近缘属的野菊不同器官酚类物质的积累与抗氧化活性,以期为太行菊的深入研究及其资源的合理开发利用提供一定理论依据。本论文从以下几个方面进行讨论:一、五种酚类物质含量研究建立太行菊和野菊不同器官绿原酸、芸香叶苷、槲皮素、木犀草素、芹菜素五种酚类物质含量的高效液相色谱测定方法,该方法的精密度、重复性、稳定性及回收率等均满足检测要求。结果表明,太行菊叶中五种化合物的含量高于其花、茎和野菊对应器官。其中,绿原酸、芸香叶苷及槲皮素含量较高,木犀草素和芹菜素的含量较低,且茎叶有未检出。比较研究索氏、超声和水浴加热三种提取方法所得两种菊试样中五种酚类物质的含量,结果表明三种提取方法所得五种酚类物质含量接近,水浴加热和超声提取所得提取液稳定性较好,水浴加热和索氏提取所得提取液五种酚类物质含量稍高。三种提取方法各有特点,可根据不同实验目的和条件选择合适的提取方式。应用建立的液相色谱方法,研究超声提取条件不同生长时期太行菊和野菊不同器官五种酚类物质含量的动态变化。结果显示,不同采收期太行菊不同器官五种酚类物质含量高于同期采收野菊的对应器官。两种菊试样不同器官中五种酚类含量在生长期先增加后降低,呈现单峰型变化趋势,营养生长期6月9日左右五种酚类物质含量最高,随后含量下降,进入花期略升高后又有所降低。二、不同生长期总黄酮与多酚含量的积累与抗氧化活性研究不同生长期太行菊和野菊不同器官水浴加热所得70%醇提液清除ABTS与DPPH自由基的能力,考察提取液中总黄酮与多酚物质的积累,探讨自由基清除能力与总黄酮多酚类物质含量的关联。结果表明,不同生长时期太行菊和野菊不同器官提取液均有一定清除ABTS与DPPH自由基的能力。其提取液的自由基清除能力、紫外-可见吸收光谱值、总黄酮与多酚含量在同一时期各器官间趋势大体一致,均呈现为:太行菊叶>野菊叶≈太行菊花>野菊花>太行菊茎>野菊茎,即太行菊各器官高于野菊对应器官。相关性分析显示,总黄酮与多酚含量,紫外-可见吸收光谱值与抗氧化能力间均呈显著正相关,进一步证实总黄酮与多酚类物质是其自由基清除能力的重要贡献因素。太行菊和野菊各器官提取液自由基清除能力、紫外-可见吸收光谱值及总黄酮与多酚含量在整个生长周期变化趋势基本一致,即均营养生长期6月9日左右达到最高,继而随植株生长逐渐降低,进入花期后各参数值略升高后又降低,出现单峰型变化趋势,为太行菊的适时采摘与合理开发提供一定理论依据。三、水提液抗氧化活性与五种酚类物质含量研究太行菊和野菊不同器官总黄酮与多酚含量、水提液的抗氧化活性和相应的紫外-可见光谱特性及绿原酸、芸香叶苷、槲皮素、木犀草素、芹菜素五种酚类物质的含量。结果表明,太行菊和野菊不同器官水提液均有一定抗氧化活性,且活性与添加量、提取温度与时间相关。太行菊叶和花,野菊花的抗氧化活性较为突出,太行菊不同器官水提液抗氧化活性相当或高于野菊对应器官,与其相应水提液的紫外-可见光谱240-400nm处出现的黄酮多酚吸收峰值及总黄酮和多酚含量结果一致;太行菊水提液中绿原酸、芸香叶苷、槲皮素、木犀草素、芹菜素五种酚类物质含量高于野菊对应器官。两种菊高温短时水提液的抗氧化活性均较高,初步证实沸水冲饮菊花的传统有一定依据。四、醇提液抗氧化活性与五种酚类物质含量比较研究太行菊和野菊不同器官醇提液的抗氧化活性,紫外-可见吸收光谱特性,绿原酸、芸香叶苷、槲皮素、木犀草素、芹菜素五种酚类物质的含量以及抗氧化活性与总黄酮和多酚含量的相关性。结果显示,太行菊和野菊不同器官醇提液均有一定的抗氧化能力,太行菊各器官提取液抗氧化活性,紫外-可见光谱吸收峰、总黄酮和多酚含量、五种酚类物质含量高于野菊对应器官。相关性分析结果显示,总黄酮和多酚对菊试样抗氧化活性有较大贡献,ABTS和DPPH两种抗氧化活性评价方法间存在较高相关性。五、五种菊花水与乙醇提取液抗氧化活性以太行菊花、野菊花与随机选择的三种市售怀菊花、贡菊花和杭白菊花为研究材料,比较研究五种菊花水与乙醇提取液的抗氧化活性及紫外-可见吸收光谱特性,以抗氧化活性为例,初步探讨太行菊和传统菊花间的差异。结果表明,五种菊花水与乙醇提取液均具有一定自由基清除能力,且存在剂量效应关系;太行菊花和怀菊花的ABTS和DPPH自由基清除能力与紫外-可见吸收峰值相对较高。虽体外抗氧化活性并不能真实反映体内活性,但由上述实验可知,较传统野菊及市售常用菊花品种,太行菊的药用和保健功效值得关注。
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