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目的卵巢癌一种女性生殖系统恶性肿瘤死亡率较高,其发病隐蔽,临床症状不明显,目前无论是检测方法还是治疗手段均十分局限。为打破这一局面,新型特异性标志物的发掘迫在眉睫。新近发现肿瘤组织中存在肿瘤内皮细胞标志物(TEMs),而在正常组织中少量表达或不表达,能够成为良好的肿瘤标志物。内皮唾液酸蛋白(TEM1/endosialin/CD248)作为其中之一,首先被发现与肿瘤血管相关的周细胞和肌成纤维细胞中,随后研究证明TEM1在卵巢癌组织中高表达,与体内其他器官差异明显。抗体靶向技术在肿瘤检测及治疗领域的应用越发广泛,针对TEM1这一卵巢癌特异性标志物设计抗体靶向的检测技术,能够为卵巢癌的诊断及治疗提供新的思路,具有良好的应用前景。方法将应用酵母展示技术筛选出来的高亲和的抗TEM1的单链抗体应用PCR的方法进行基因工程改造,人为在单链抗体的末端加入一个半胱氨酸。在应用特殊的化学集团特异性反映的原理,应用分别带有两个不同功能集团的linker,将单链抗体与相应的荧光染料或是磁性纳米颗粒进行连接,从而获得特异性的荧光探针或核磁探针。对改造好的探针应用细胞elisa的方法进行抗体亲和力的检测,应用流式细胞仪的方法对抗体的特异性与内吞效果进行检测,在通过动物实验,对特异性探针在活体中的应用进行了评价。结果1.实验结果显示,最终用于后续实验的改造后的可溶性单链抗体的亲和力高达3.941 nM,为之后整个课题的完成提供了极大的保障。2.建立了一种特异性针对卵巢癌血管内皮蛋白TEM1的MRI检测体系,并成功将其应用与相应的动物模型上,检测到了活成成像时候的特异性。3.建立了一种特异性针对卵巢癌血管内皮蛋白TEM1的ICG荧光体系。构建好的荧光探针经过细胞elisa的方法检测其亲和力达到8.091 nM,同时应用流式细胞仪的方法检测到抗体自身的特异性并没有由于荧光染料的加入而改变,同时应用近红外荧光检测的方法从荧光方向同样验证了抗体的特异性。最后应用TEM+的动物模型,以活体成像的方式证明了所构建的特异性荧光探针在注射入体内48小时后,可以特异性的检测出TEM+的肿瘤。结论通过对单链抗体的改造,成功的构建出了特异性的针对TEM1的荧光探针与核磁探针,并且通过相关实验检测证实构建好的荧光探针或是核磁探针仍然具有较高的亲和力,同时抗体的特异性以及内囤的效果都得到了保留。在动物实验上更证实所构建的探针可以特异性的检测到TEM+的肿瘤模型。这些实验结果都为今后探针在临床上的应用提供了保障。