量子点荧光探针法应用于聚丙烯酰胺凝胶电泳检测血清蛋白质

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本论文分为两部分,在第一部分里建立了以量子点为荧光探针应用于聚丙烯酰胺凝胶电泳分离后人血清蛋白质的检测。这个方法是建立在量子点可以作为荧光探针和它能够与蛋白质结合这两个理论基础之上,开辟了一条量子点荧光探针法检测蛋白质的新途径。采用此方法分别检测了单向,双向聚丙烯酰胺凝胶电泳分离的人血清蛋白质,实验结果表明此方法不仅可以直接在凝胶上进行检测,还适用于在蛋白质电泳印迹法之后检测蛋白质,并且不干扰之后的考马斯亮兰染色等其他检测方法的二次成像。此外,本文建立的方法的灵敏度比考马斯亮蓝染色法要高,且分析时间短。同时我们还对量子点荧光探针法的条件进行了优化,对量子点浓度和巯基乙酸浓度等实验条件都进行了考察,并对量子点与蛋白结合的机理进行了讨论。   在第二部分里,本文进行了离子色谱电导检测法分离和检测四种生物碱:胞嘧啶,5-甲基胞嘧啶,腺嘌呤和6-甲基腺嘌呤四种生物碱的研究。考察了流动相的种类、浓度、流速以及进样量对于峰高,保留时间,分离效果以及检测灵敏度的影响。四种生物碱在在十分钟内获得了好的分离。该方法也被成功应用测定小牛胸腺DNA中四种生物碱的含量。并且与传统的高效液相法进行了比较,该方法的灵敏度高、线性范围宽、简单迅速,且干扰小。
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