第一部分孤独症发生的相关因素研究　　目的：　　探讨生物学父母生育年龄及围生期等因素对孤独症发病的影响，为孤独症早期干预及改善临床症状提供依据。　　方法：　　收集2010年2月至2012年1月在上海交通大学医学院附属精神卫生中心咨询部儿少门诊就诊的孤独症患儿为研究组，采用美国精神疾病诊断与统计手册-第四版（DSM-IV）诊断标准进行诊断。采用性别年龄分层法收集上海市中小学学生为对照组。研究者自行编制调查表，收集影响孤独症的相关因素信息。采用单因素logistic回归分析对各因变量进行筛选，有阳性结果的进入非条件多因素logistic回归分析。　　结果：　　1．较高的父亲生育年龄是子女罹患孤独症的危险因素，并呈现出普遍比母亲生育年龄高的特点。　　2．在与孤独症有关的因素中，新生儿黄疸、母孕期感染、母孕期流行性感冒、新生儿窒息、父母关系不和睦、主要抚养人非父母、非母乳喂养是引起孤独症发病的危险因素。　　3．与男性患儿相比，女性患儿对较高的父亲生育年龄更敏感。　　结论：　　1．父亲生育年龄较高可能是子女罹患孤独症的危险因素。　　2．环境及家庭因素可能是孤独症发病的危险因素之一。　　第二部分NRXN1基因在汉族核心家系孤独症儿童的突变研究　　目的：　　1．探讨中国汉族孤独症儿童NRXN1基因变异发生情况。　　2．探讨NRXN1基因的变异对所编码蛋白的功能影响。　　方法：　　1．收集符合美国精神障碍诊断与统计手册第四版（DSM-IV）诊断标准的288例孤独症患儿及其核心家系，并收集与研究组性别相匹配的384名健康对照的血样。对血样进行DNA提取，采用sanger测序法对目的片段进行测序。利用Mutation Surveyor软件读取测序结果，利用χ2检验对研究组和对照组的SNP进行统计分析。　　2．选取合适标签SNP，对孤独症核心家系血样DNA进行甲基化修饰检测。　　3．构建GFP融合蛋白载体，转染细胞，进行荧光定位实验。　　结果：　　1．研究组样本中，发现8个错义突变，分别为： NRXN1-α中有p.G65S，c.193G>A；p.P159S，c.475C>T；p.D206H，c.616G>C；p.I794T，c.2381T>C；p.I1086V，c.3202A>G； NRXN1-β中有p.S14L，c.41C>T；p.R345stop codon，c.1033C>T；p.R345Q，c.1034G>A。其中除p.S14L外，都是未曾报道过的突变点；p.P159S，p.D206H是de novo，其他均来自母系遗传。对照组样本中未发现这些错义突变。　　2．与对照组相比，研究组中 NRXN1基因5’UTR区中SNP rs13422484（P=0.79）和rs3732049（P=0.053）的不同基因型存在频率无统计学意义。　　3．荧光定位实验证实，病例组中突变点p.R345stop codon影响到neurexin蛋白在细胞膜的定位。　　4．检测甲基化修饰实验表明：不同父源母源的NRXN1基因不存在甲基化修饰的差异。　　结论：　　1．NRXN1基因是孤独症的易感基因，其稀有突变可能影响到neurexin蛋白的正常功能。　　2．本研究中的研究组和对照组中NRXN1基因5’UTR区的SNP rs13422484和 rs3732049未显示出显著的统计学差异。　　3．NRXN1基因可能不存在不同父源母源甲基化修饰的差异。