CD133通过上皮间质转化促进胃癌侵袭和转移的实验研究

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目的:  观察胃癌细胞CD133表达及上皮间质转化(EMT)相关因子与胃癌侵袭转移的关系,进一步探讨CD133是否经EMT促进胃癌侵袭与转移。  材料与方法:  通过免疫磁珠分选技术,将KATO-III细胞分为CD133+组和CD133—组,利用Transwell小室法检测侵袭能力,Western blot和RT-PCR方法检测EMT相关因子的表达差异以及siRNA诱导CD133基因沉默后EMT相关因子表达的改变;Western blot方法检测50例胃癌组织CD133和EMT相关因子的表达,并研究两者相关性及与胃癌临床病理特征和预后的关系。  结果:  CD133+ KATO-III细胞组穿膜细胞数(67.66±10.47)显著高于CD133—组(13.33±6.76,P=0.001),CD133+组中Snail、N-cadherin mRNA表达相对灰度值为0.311±0.015、0.581±0.020显著高于CD133—组(0.223±0.016,P=0.04;0.270±0.018,P=0.004);CD133+组中Snail、N-cadherin蛋白表达相对灰度值为0.513±0.015、0.538±0.028,显著高于CD133—组(0.179±0.023,P=0.03;0.202±0.032,P=0.02);CD133+组中E-cadherin mRNA及蛋白表达相对灰度值分别为0.231±0.009、0.426±0.030,显著低于CD133—组(0.460±0.015,P=0.04;0.748±0.027,P=0.04)。siRNA干扰CD133基因表达后,KATO-III细胞穿膜细胞数显著降低(P<0.05),Snail、N-cadherin mRNA表达相对灰度值为0.410±0.009和0.136±0.009,显著低于空白对照组(0.621±0.010,P=0.04;0.685±0.018,P=0.01)。Snail、N-cadherin蛋白表达相对灰度值为0.157±0.013和0.217±0.023,显著低于空白对照组(0.513±0.015,P=0.02;0.538±0.028,P=0.03);而与空白对照组相比(0.279±0.009,0.648±0.027),E-cadherin mRNA及蛋白表达相对灰度值明显增高(0.658±0.001,P=0.01;0.426±0.030,P=0.03)。胃癌组织中Snail及N-cadherin蛋白的表达与CD133表达呈正相关(P<0.05),E-cadherin的表达与CD133表达呈负相关(P<0.05),Snail、N-cadherin及CD133蛋白低表达组的生存时间明显长于其高表达者(P<0.05),联合EMT相关因子和CD133蛋白表达能够最有效预测患者生存。  结论:  CD133+胃癌细胞具有更强的侵袭能力,并可能通过EMT促进胃癌的侵袭和转移。
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