【摘 要】
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该研究将沙丁胺醇琥珀酸单酯化后应用混合酸酐法将之与牛血清白蛋白偶联,制备全抗原后免疫Balb/c小鼠,用杂交瘤技术建立了一株稳定分泌抗沙丁胺醇单克隆抗体的杂交瘤细胞株,
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该研究将沙丁胺醇琥珀酸单酯化后应用混合酸酐法将之与牛血清白蛋白偶联,制备全抗原后免疫Balb/c小鼠,用杂交瘤技术建立了一株稳定分泌抗沙丁胺醇单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为1C<,2>F<,10>,并对1C<,2>F<,10>细胞进行了鉴定和抗体应用技术的深入研究.应用双向免疫扩散方法对1C<,2>F<,10>抗体进行鉴定,确定1C<,2>F<,10>抗体属IgG<,1>亚类;应用非竞争间接ELISA测定腹水抗体亲合力常数为1.0928×10<10>1/mol,抗体与克仑特罗交叉反应为255,与莱克多巴胺的交叉反应小于0.1﹪.间接酶联免疫吸附试验测定细胞上清抗体效价为1:3.2×10<5>,腹水抗体效价为1:6.4×10<8>.秋水仙素阻抑汉计算该细胞染色体数平均为96,体外传代培养和冻存复苏后分泌抗体稳定.以1C<,2>F<,10>单抗为基础,对检测β-肾上腺素能兴奋剂的技术路线进行了初步研究,建立了间接竞争抑制ELISA方法,该方法对沙丁胺醇的最低检出限为1ng/ml,对克伦特罗有一定的检出经,检出限为5ng/ml,添加回收率为90﹪~105﹪.
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