【摘 要】
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猴头菌是一种重要的药食两用真菌,由于具有重要的生物活性,一直是研究的热点。本文以液体发酵生产的猴头菌丝为原料,对猴头多糖的提取工艺、猴头多糖的分离纯化、多糖纯品的性质
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猴头菌是一种重要的药食两用真菌,由于具有重要的生物活性,一直是研究的热点。本文以液体发酵生产的猴头菌丝为原料,对猴头多糖的提取工艺、猴头多糖的分离纯化、多糖纯品的性质、多糖的降血糖作用、免疫调节作用、抗氧化作用、耐缺氧作用进行了系统研究。得出如下结论:
1.采取单因素试验结合正交试验的方法,通过热水提取法从液体发酵生产的猴头菌丝中提取猴头多糖,提取的最佳工艺为:加水倍数为30倍、提取温度为80℃、提取3h、用无水乙醇沉淀多糖,此条件下的多糖得率为9.478%。同时,在热水提取法的基础上,研究了稀酸、稀碱、稀盐提取法对多糖得率的影响,结果表明:稀酸、稀碱条件下部分多糖发生水解,使多糖得率下降,稀盐条件对多糖得率的影响不明显。
2.采用Sevag法去除蛋白质杂质,结果表明:随着Sevag法处理次数的增加,多糖得率明显下降;同时,Sevag法除猴头粗多糖中蛋白质杂质的次数不应超过5次。
3.猴头多糖HMP经DEAE-纤维素凝胶柱层析粗步纯化,得到主要分布于蒸馏水洗脱液中的多糖级分HMP I,HMP I经Sephadex G-100凝胶柱层析进一步纯化,得到两个单一组分HMP Ia和HMP Ib,其中HMP Ia是主要多糖级分。
4.多糖纯品HMP Ia经完全酸水解,采用HPLC方法分析单糖的组成,结果表明:猴头多糖的组成单糖为D-葡萄糖、D-木糖、D-果糖和D-半乳糖,单糖的摩尔比为:1:18.3:7.9:1.1。其红外图谱表明:猴头多糖存在分子内和分子间的氢键,分子中存在C-H键伸缩振动,存在-OH的变形振动,存在呋喃糖苷吸收峰。
5.猴头菌丝多糖HMP具有明显的降血糖作用,而且降血糖作用随着多糖的浓度增加而加强;在免疫调节作用方面,HMP能够明显增强小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能,能够明显促进胸腺器官的发育,具有明显的迟发型超敏反应,具有良好的免疫调节作用:HMP能够明显提高血清、大脑、肝脏的SOD、CAT含量,能够降低大脑、肝脏的MDA含量,具有明显的抗氧化功能;同时,HMP具有较强的提高机体耐缺氧能力的作用,而且作用效果随多糖浓度增加而加强。
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