植物寄生线虫相关复合侵染病害的生防微生物研究

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研究对植物寄生线虫和病原菌均具有拮抗活性的双抗生防菌对于防治植物寄生线虫与土传病原菌协同侵染同一寄主引起的复合病害有重要的科学意义和应用价值。   本研究以1000株线虫生防细菌和放线菌为资源,以全齿复活线虫(Panagrellus redivivus)和烟草黑胫病菌(Phytophthora parasitica var. nicotianae)为靶标,筛选既毒杀线虫又拮抗病原真菌的双抗功能生防菌株;对获得的双抗菌株进行了系统亲缘关系分析;鉴定了其中一株双抗功能生防菌的杀线虫化合物;对六株杀线虫活性较好的细菌进行了多相分类鉴定;获得以下主要研究结果:   1.以全齿复活线虫和烟草黑胫病菌为靶标,从分离自全国26个省(市)187份农业土壤样品中的1000株杀线虫细菌和放线菌中筛选出29株双抗功能生防菌,其对线虫48h的致死率在50-100%之间;对烟草黑胫病菌的抑制率在40-76%之间。   2.通过16SrRNA基因系统发育分析,这29株双抗功能生防菌分属10属、15种。芽孢杆菌属5种12株:Bacillus anthracis GD1,GD17,GD58,GD72,JS41,JL97,NX4,NX28,B.aryabhattai GD23,B.drentensis GD25,B.stratosphericus GD65,B.tequilensisC;假单胞菌属1种1株:PseudomonasgeniculataJS19;葡萄球菌属1种1株:Staphylococcus warneriD;北里孢菌属1种1株:Kitasatospora nipponensisH2-4;节杆菌属1种1株:Arthrobacter humicolaJL9;短波单胞菌属1种4株:Brevundimonas diminutaGD66,GD69,GD75,JL105;埃希氏菌属1种2株:Escherichia coliGD8,BJLSH4;不动杆菌属1种1株:Acinetobacter ursingiiBJSS3;无色杆菌属1种4株:Achromobacter piechaudiiSHJC27,JXXG23,JXXG39,SXMLS11;链霉菌属2种2株:Streptomycesneopeptinius JXXG24,S.flavofungini BJLSH9。   3.黄抗霉素链霉菌(S.flavofungini)BJLSH9菌株对线虫的致死率为98%,对烟草黑胫病菌的拮抗率为50%,且兼抗小麦根腐病菌、立枯丝核菌和小麦赤霉菌。从BJLSH9菌株的次生代谢产物中鉴定出一种杀线虫化合物tryptophandehydrobutyrine diketopiperazine(TDD),化学式为C13H17N3O2,分子量为288.33。该化合物对全齿复活线虫48h的致死率为40%,该化合物的杀线虫活性为首次报道。   4.对六株48h线虫致死率为100%的细菌进行多相分类鉴定,将菌株SX103鉴定为新种,命名为“杀线虫鞘氨醇杆菌(Sphingobacterium nematocida sp.nov.)”。通过16SrRNA系统发育分析生理生化特征分析,确定了其它5株线虫生防菌(SH8、FJ9、GX4、GX18、S230)的分类地位。
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