玉米赤霉烯酮(Zearalenone，ZEN)是一类主要由禾谷镰刀菌(Fusariumgraminearum)产生的真菌毒素，广泛存在于玉米、大麦、燕麦、小麦、大米和高粱等粮食作物中。它性质稳定、能耐高温，可引起动物发生雌激素中毒症，对人也有一定的毒害作用。ZEN不仅具有生殖发育毒性、免疫毒性、肝毒性、细胞毒性和遗传毒性，对肿瘤的发生及内分泌系统也有一定的影响。　　目前，用于检测玉米赤霉烯酮的分析方法主要分为三类：色谱检测法、微生物检测法和免疫学检测法。这些方法各有利弊，比较而言，专一性强、灵敏度高、快速方便、操作简单、成本低、可一次性检测大量样品的免疫学检测法(比如应用单克隆抗体的ELISA检测方法)显得更为方便实用，越来越受到检测机构的欢迎和研究人员的重视。　　国内针对ZEN的检测试剂盒目前仍主要来源于进口，价格十分昂贵。因此，建立其灵敏、可靠、快速的ELISA检测法，发展高质量的国产试剂盒具有重要意义，可以为我国进行粮食和饲料中ZEN的污染情况调查及制定国标ZEN建议值提供技术支持。　　本研究采用羧甲基羟胺半盐酸盐一步合成出半抗原，然后直接用活泼酯法将半抗原与载体蛋白偶联成完全抗原，并利用单克隆抗体技术制备了灵敏度高、专一性强、效价高及稳定性好的抗体，建立了ZEN的CI-ELISA检测方法。小麦样品加标回收实验说明了本实验建立的CI-ELISA检测方法是稳定、可靠的。　　1、半抗原及全抗原的合成与鉴定。采用羧甲基羟胺半盐酸盐一步合成出半抗原，然后直接用活泼酯法将半抗原与载体蛋白偶联，操作步骤简单，而且所使用的试剂都很普通，容易获得。通过TLC、HPLC和液相-质谱联用技术三种方法依次进行半抗原的鉴定；采用紫外光谱法、结合比的测定以及免疫学方法进行全抗原的检测，结果皆表明目标半抗原及全抗原合成成功。　　2、ZEN单抗的制备及鉴定。用ZEN-BSA免疫8周龄BALB/C小鼠，五免后血清效价在1:8000以上。利用细胞融合技术和单克隆抗体技术，筛选到1株可稳定分泌针对ZEN的抗体的杂交瘤细胞株3D10。实验结果显示，该细胞上清中抗体的稳定性较好，效价基本保持不变。用3D10杂交瘤细胞株制备腹水，腹水效价可以达到1×106。其与ZEN结构类似物有一定的交叉反应，而与其他三种参试真菌毒素基本没有交叉反应，说明其特异性较高。腹水对ZEN具有较高的灵敏度，抑制曲线的线性回归方程为Y=1.0669-0.241X(R2=0.9869)，IC50值为0.225μg/mL，IC10值为4.93ng/mL。　　3、CI-ELISA检测方法的建立。确定了间接竞争ELISA的最佳工作条件：最佳封闭条件为2％浓度的脱脂奶粉(PBS溶解)；包被抗原的最佳工作浓度为2μg/mL；腹水的最佳稀释倍数为1×106倍；样品提取液乙腈的最佳浓度为10％。在本实验建立的CI-ELISA最佳工作条件下，建立ZEN CI-ELISA标准曲线，其线性回归方程为Y=0.0807-0.0313X，R2=0.9906，标准曲线在0.01μg/mL～10μg/mL范围内，呈良好线性。　　4、小麦中ZEN添加回收实验。ZEN的回收率在75.15%～82.69％，变异系数在10％以内。采用本实验建立的CI-ELISA方法对实际小麦样品进行了ZEN的含量测定，并将检测结果与HPLC的检测结果进行了比对分析，两者的结果基本一致。