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目的：对人子宫切除的内膜组织使用两种不同的分离方法分离子宫内膜成体干细胞，比较后得出一种实用、可靠、高效的分离方法，同时对分离得到的细胞进行培养扩增与鉴定。 方法：使用组织消化法和联合分离法(组织消化+密度梯度离心)对相同取材的组织进行细胞分离，比较两种分离方法哪种得到的活细胞数量多。对培养的细胞进行传代扩增培养，并计算扩增倍数。观察细胞的生长状态、数量、形态等情况。用免疫荧光抗体细胞角蛋白(CK)-19和波形蛋白(Vimentin)对培养的细胞进行染色，鉴定培养细胞的来源。用造血干细胞标志物CD90和间充质干细胞标志物CD146进行流式细胞分选，鉴定培养的细胞是否表达干细胞标志物。 结果：子宫内膜成体干细胞接种24h后大部分细胞已贴壁，腺上皮细胞由多角形或蝌蚪形向细胞团或岛状克隆生长；间质细胞由轮廓清晰的梭形向两端突起的纺锤状生长，细胞间放射状排列或平行排列。子宫内膜成体干细胞贴壁稀疏时细胞排列混乱，出现致密贴壁细胞层后细胞集落呈漩涡状排列，无极性。对两种分离方法得到的子宫内膜成体干细胞的活细胞数量进行比较，得出联合分离法得到的活细胞数(31.2±3.190×104)明显多于单用组织消化法(26±3.528×104)，差异显著(P<0.01)，有统计学意义。两组间年龄比较差异无统计学意义(P>0.05)。细胞传代5代扩增约6.9×102倍。经对培养的细胞进行CK-19和Vimentin的免疫荧光染色结果为阳性，对照组染色为阴性。流式细胞分选对培养的细胞进行CD90和CD146抗体鉴定结果均为阳性，且CD90高表达(34.33％)，CD146低表达(3.25％)，对照组不表达。 结论：成功的从人子宫切除的内膜组织中分离培养得到子宫内膜成体干细胞，子宫内膜成体干细胞具有高度增殖的能力。采取联合分离的方法是获得子宫内膜成体干细胞的一种更加实用、可靠、高效的分离方法。