基于TGF-β/Smad信号通路探讨小半夏加茯苓汤醇提物抑制胃癌细胞侵袭的实验研究

来源 :贵阳中医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jywaco
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:研究小半夏加茯苓汤醇提物对胃癌细胞SGC-7901的增殖、凋亡以及侵袭迁移的影响、并且对上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关基因E-cadherin、N-cadherin、Vimentin以及TGF-β/Smad信号通路相关基因TGFβ1、Smad2、Twist1和Snail的影响,探讨该复方体外抑制SGC-7901侵袭转移的分子机制,为临床应用该复方辅助治疗肿瘤疾病提供理论支撑和实验依据。  方法:制备小半夏加茯苓汤醇提物,运用倒置相差显微镜观察小半夏加茯苓汤醇提物对胃癌细胞SGC-7901在TGF-β1细胞因子刺激下形态的影响;运用CCK-8法分别检测不同浓度的小半夏加茯苓汤醇提物对SGC-7901的抑制作用,并计算生长抑制率及半数抑制浓度;运用细胞划痕实验、Transwell实验观察小半夏加茯苓汤醇提物对在TGF-β1细胞因子刺激下SGC-7901侵袭、迁移的影响;运用TUNEL法检测600μg/mL、800μg/mL的小半夏加茯苓汤醇提物对SGC-790124h凋亡的影响;运用实时荧光定量PCR检测600μg/mL、800μ/gmL的小半夏加茯苓汤醇提物对SGC-7901在TGF-β1细胞因子作用下E-cadherin、N-cadherin、Vimentin以及TGF-β/Smad信号通路相关基因TGF-β1、Smad2、Twist1和Snail等表达的情况。运用Western Blot检测600μg/mL、800μg/mL的小半夏加茯苓汤醇提物对SGC-7901在TGF-β1细胞因子作用下TGF-β/Smad信号通路中相关蛋白Vimentin和Snail表达的情况。采用SPSS23.0统计软件进行统计分析  结果:1、CCK-8法检测发现不同浓度的小半夏加茯苓汤醇提物对SGC-7901均有不同程度的抑制作用(P<0.01),并且有浓度时间依赖性;小半夏加茯苓汤醇提物作用于SGC-790124h、48h的半数抑制浓度分别为506.533μg/mL和483.212μg/mL。2、细胞观察发现,经TGF-β1细胞因子刺激分别培养0h、24h、36h和48h后,部分SGC-7901细胞失去上皮细胞原有的典型的鹅卵石样、铺路石样形态,呈较为明显的梭形及纺锤体形改变,细胞伪足增多变长,细胞排列较为松散杂乱。小半夏加茯苓汤醇提物中剂量组和大剂量组均可抑制该过程,使胃癌细胞恢复上皮样细胞形态。3、TUNEL法检测发现,与同时段的空白对照组相比,小半夏加茯苓汤醇提物组有促进细胞凋亡的作用,并且细胞凋亡率随着浓度的增大和时间的延长而升高。4、划痕实验和Transwell实验发现,小半夏加茯苓汤醇提物能够抑制胃癌细胞SGC-7901的侵袭和迁移,并且与浓度时间呈正相关。5、实时荧光定量PCR法检测发现,与TGF-β1模型组相比,小半夏加茯苓汤醇提物中剂量组、大剂量组均能扭转EMT相关基因的相对表达量的变化(P<0.05),并且小半夏加茯苓汤中剂量组、大剂量组能够抑制TGF-β/Smad信号通路中相关基因的相对表达量的变化(P<0.05)。6、Western Blot结果显示,与TGF-β1模型组相比,小半夏加茯苓汤醇提物中剂量组、大剂量组均能抑制Vimentin、Snail蛋白的表达,并且与浓度时间呈正相关。  结论:1、小半夏加茯苓汤醇提物对胃癌细胞SGC-7901的增殖有明显的抑制作用,其抑制率与小半夏加茯苓汤醇提物浓度和作用时间呈正相关,并且能够诱导胃癌细胞SGC-7901凋亡的发生。2、小半夏加茯苓汤醇提物能够抑制胃癌细胞SGC-7901的侵袭和迁移。其机制可能是:通过抑制TGF-β/Smad信号通路中相关基因的表达从而扭转EMT的发生,最终抑制肿瘤细胞的侵袭和迁移,为中医散饮降逆法对于胃癌侵袭与转移的治疗提供了借鉴。
其他文献
本文根据高中生英语成绩差以及高中英语教学的现状,指出高中英语教学应采取的相应对策,论述如何才能提高课堂教学质量,打造有效课堂。 Based on the poor grades of senior
在当今社会环境下,随着媒介技术的发展,信息传播方式多样化,信息传播更加快捷方便。媒介在社会生活中所扮演的角色变得比以往任何时代都更为重要,尤其是在一些网络群体事件中
【目的】评价慢性丙型肝炎患者的生存质量,及其与中医证型的关联性。   【方法】应用世界卫生组织在生存质量测定简表(WHOQOL-BREF)、SF-36量表和慢性肝病问卷(CLDQ)调查88
汉语学习的经验、迁移对于初中英语基础入门阶段的教学方法具有导引、借鉴的作用,音标与汉语拼音、字母组合和汉字的偏旁部首,课外阅读,影视作用。本文对初中英语教学方法进
随着我国实现全面小康社会的开始,国家政策对农村的扶持力度显著提高,为解决“农村城镇化”的问题成为农村改造的重点.是传统农村向现代城市文明的一种变迁,是统筹城乡发展、
报业“严冬”论已流行几年了,大众报业集团董事长、总编辑傅绍万却反其道而行之,力挺纸媒,并以大众报业为基地,取得了骄人的业绩。这些体会与经验,均在其2012年7月由红旗出版
在2013年高考中,“动词的时态与语态”这一考点依然占有很大比例。全国各省市18份高考卷中,有10份以上在单项填空题中设置2个或2个以上的动词时态、语态题。其中北京卷和湖南
“和”作为中国古代哲学极具特色的思想观念之一,长期以来是中华民族普遍认可的人文精神。植根于神州大地的中医学,是自然科学、社会科学与中国古代哲学相互渗透的产物,因而“和
生命体的一大特征是活化与进化的过程中具有秩序性,而这有序性与外界环境密切相关。古人通过对自然变化的周期性规律及其对疾病影响的长期观察和经验累积,形成了独具特色的中医
本文通过对荣华二采区10