阿尔茨海默症（Alzheimer disease，AD）是一种神经退行性疾病，在其病理研究中 tau蛋白的作用机制一直是研究的重点之一。同时，研究证明，tau蛋白的过表达可以抑制细胞凋亡，对细胞发挥一定的保护作用。tau蛋白作为一种微管相关蛋白，主要分布在细胞质，细胞核内也有存在。目前tau蛋白抗凋亡的具体作用机制和tau蛋白的入核机制都未明确。　　本研究在已有的基础上对tau蛋白的入核及其抗凋亡作用及机制进行了探讨。为了初步探讨tau是否含有疑似入核序列，我们将表达人类全长tau蛋白的eGFP-C1-tau441质粒一分为二，构建质粒eGFP-C1-tau（1-220）和eGFP-C1-tau（221-441），通过序列分析比对，证明了构建质粒的序列正确。将三种质粒eGFP-C1-tau441，eGFP-C1-tau（1-220），eGFP-C1-tau（221-441）分别转染鼠成神经瘤细胞株（N2a）48h后进行蛋白电泳，用识别tau不同位点的抗体tau1和tau5对各组蛋白表达物进行鉴定，证明质粒构建和表达成功。将三种质粒分别转染鼠成神经瘤细胞株（N2a）48h荧光染色照相，结果显示，与另外两种质粒转染组相比，tau（1-220）表达产物在胞浆和胞核内表达均匀，而另外两种表达产物主要位于胞浆内，免疫印迹实验也证实了荧光结果，因此我们判断tau（1-220）更容易入核。为探讨不同tau序列的过表达对细胞凋亡的影响，对转染 eGFP-C1-tau441、eGFP-C1-tau（1-220）和eGFP-C1-vector空载质粒后的细胞用0.5μmol/L广谱凋亡诱导剂 staurosporine（STP）进行3h凋亡诱导后提全蛋白以及核蛋白进行免疫印迹（Cleaved Caspase-3和Bcl-2蛋白作为凋亡标记物），结果表明，与空载组比较，tau441和tau（1-220）组均具有显著的抗凋亡作用[tau441，n=3，p<0.05；tau（1-220），n=3，p<0.01]，而且凋亡诱导后核蛋白内tau蛋白的含量尤其是tau（1-220）组明显升高（n=3，p<0.01）。为进一步研究tau蛋白抗凋亡时入核的tau441或者tau（1-220）片段与核内DNA的关系，我们将转染eGFP-C1-tau441，eGFP-C1-tau（1-220）质粒的细胞在凋亡诱导前3h先加入20μmol/L纺锤菌素（抑制蛋白与DNA小沟结合）培养，然后进行凋亡诱导（0.5μmol/L STP处理3h，该处理过程中不撤除纺锤菌素）后提取全蛋白和核蛋白进行免疫印迹后的结果表明，tau（1-220）转染组加上纺锤菌素组与不加组相比Cleaved Caspase-3蛋白量明显增加（n=3，p<0.05），表明tau蛋白的抗凋亡能力降低。同时，提取核蛋白进行的免疫印迹也表明，加入纺锤菌素之后，凋亡诱导所导致的核内tau蛋白量升高这一现象发生明显改变，核内蛋白量显著减少（n=3，p<0.05）。综合所有实验结果，我们推测，tau蛋白的前半段tau（1-220）序列可能带有引导tau蛋白入核的关键序列，tau蛋白的抗凋亡作用可能与入核的tau蛋白可结合 DNA小沟有关，tau蛋白可能是通过与DNA小沟的结合来维持DNA的稳定，进而发挥细胞保护作用，抑制细胞凋亡。