哺乳动物体细胞核移植技术的出现使得利用长时间体外培养的细胞系获得克隆动物成为可能，其与转基因技术的结合为医学研究提供了新的机遇和方法。 本试验主要致力于HGPRT基因敲减医学模型兔的研究。主要包括以下两部分内容: (1) 将pRNAT-U6.1/Neo质粒转染兔成纤维细胞，利用24孔细胞培养板分离培养法获得来源于单个转基因成纤维细胞克隆,然后以转基因成纤维细胞为供体细胞进行核移植，并利用PCR及多重PCR技术鉴定筛选获得的转基因细胞克隆及其核移植单个胚胎中整合的NeoR基因和β-actinDNA。证实利用条件性培养液及适当增加细胞密度可提高转基因成纤维细胞的筛选效率，以及利用多重PCR技术可快速准确的鉴定少量转基因胚胎中的外源基因。 （2）构建了针对HGPRT基因表达的shRNA干扰载体，并转染兔成纤维细胞，获得携带该干扰片段的转基因细胞株。经PCR鉴定转基因成纤维细胞克隆阳性率为83.3％。RT-PCR及Western-blot检测结果表明转基因干扰成纤维细胞系HGPRT mRNA和蛋白质表达量明显降低。最后以转基因成纤维细胞进行核移植，囊胚率为27.8％，和正常来源的成纤维细胞相比较差异不显著。 试验建立了一种快速分离培养来源于单个转基因成纤维细胞克隆及鉴定少量转基因胚胎外源基因的方法。并证实利用RNA干扰技术可稳定干扰兔成纤维细胞HGPRT基因的表达，且该转基因细胞株能够支持克隆胚发育至囊胚阶段。为进一步获得兔HGPRT基因敲减动物疾病模型奠定了基础。