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目的:探讨结直肠癌的表观遗传学发生发展机制,包括:1、检测结直肠癌中的多基因甲基化状况,寻找在结直肠癌特异性甲基化的基因谱;分析多基因甲基化与结直肠癌临床病理学特征及预后之间的关系,探讨多基因甲基化作为结直肠癌分子标记的衣据;2、探讨结直肠癌中多基因甲基化与蛋白表达之间的关系;3、探讨错配修基因hMLH1启动子甲基化与结直肠癌错配修复缺陷表型——高度微卫星不稳(MSI-H)和hMLH1蛋白表达缺失之间的关系.方法:1、甲基化特异的PCR检测65例结直肠癌[包括39例散发性结直肠癌、26例家族性非息肉病性结直肠癌(hereditary non-polyposis colorectal cancer,HNPCC),含有36例11~46个月、平均38个月术后随访资料]、8例结直肠腺瘤、16例癌远端粘膜和1例正常结肠粘膜中,32个CpG岛位点[包括30个基因启动子CpG岛及2个肿瘤甲基化(methylated in tumor,MINT)位点]的甲基化状态;2、组织芯片免疫组织化学检测58例结直肠癌(病例同前,包括34例散发性结直肠癌、24例HNPCC)中,甲基化程度不同的11个基因的蛋白表达;3、选择国际HNPCC合作小组推荐的标准微卫星位点,单核苷酸重复序列Bat25和Bat26位点,应用GeneScan分析62例结直肠癌(病例同前,包括37例结直肠癌、25例HNPCC)的微卫星不稳定性.结论:第一部分:1、检出MGMT、hMLH1、p16、p14、APC、MINT1和MINT31等7个位点是结肠肿瘤相对特异的甲基化谱,61.5﹪结直肠癌有至少其中一个位点甲基化,老年病人多见;2、MGMT、p14、RASSF1a和MINT31是结直肠癌特异性甲基化谱,33.8﹪结直肠癌有至少其中一个位点甲基化,老年病人多见;3、老龄、左半结肠发生和低分化是与多基因甲基化关系比较密切的结直肠癌临床病理学特征;4、强直肠癌CDH13示甲基化病例术后生存概率显著低与CDH13甲基化病例,低分化癌病例术后生存概率显著低于中等分化癌病例.第二部分:结直肠癌中CDH13和hMLH1启动子甲基化与其蛋白表达减弱有关,hMLH1启动子甲基化与蛋白表达的关系在散发性癌与HNPCC之间可能不同.第二部分:一部分不能检出突变的MSI-H结直肠癌存在hMLH1启动子甲基化,同时伴有hMLH1蛋白表达缺失,提示hMLH1启动子甲基化可能是部分结直肠癌错配修复功能缺陷的发生机制.