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近年来发现糖尿病肾病的发生与p38MAPK信号通路活化有关.研究显示,糖尿病大鼠肾小球中p38MAPK发生磷酸化活化,许多细胞转录因子被激活,细胞外基质蛋白的基因表达增加.高糖和牵张刺激可活化系膜细胞的p38MAPK,并诱导TGF β 1和纤维连接蛋白的表达.由此可见,p38MAPK在糖尿病状态下被高度活化,并参与了糖尿病肾病的发生.近来有研究提示,AGE诱导的糖化氧化应激在DN的发病机制中占重要地位;p38MAPK信号转导途径是一条应激敏感通路;在其它细胞系(血管平滑肌细胞)己证实,AGE可激活p38MAPK信号通路.鉴于AGE诱导肾实质细胞产生的TGF β 1在糖尿病肾病的发生发展中具有重要作用,我们将对p38MAPK信号传导通路在AGEs诱导肾小管细胞表达TGF β 1的生物学过程中的地位和作用进行探讨.小管间质损害是糖尿病肾病的重要表现,与肾功能的下降密切相关.持续高血糖和小管间质损伤的进展之间的病理联系还不完全清楚,但肌成纤维细胞的出现是小管-间质纤维化发生的一个重要标志.肌成纤维细胞兼具有平滑肌细胞和成纤维细胞的生化和结构特性,是纤维化疾病中细胞外基质产生的主要来源.这些细胞的起源不完全清楚.但是,近端小管上皮向细胞肌成纤维细胞的转分化是肌成纤维细胞形成的机制之一.众所周知,TGF-β在近端小管上皮转分化的过程中起重要作用.TGF-β可通过活化其下游的Smads信号蛋白诱导许多细胞产生ECM.在与其受体结合后,TGF-β可激活受体调节的Smads(Smad2和Smad3),活化的Smad2和Smad3与协同Smads(Smad4)形成异源性复合物并转位于细胞核内,调节靶基因的表达.TGF β信号通路的活化也可引起抑制性Smad(包括Smad6和Smad7)的表达.这些抑制性Smad可通过负反馈环阻断Smad2和Smad3与TGF β受体结合,而抑制Smad2和Smad3磷酸化.许多研究证实,AGEs能刺激许多细胞ECM的合成,可通过刺激TGF-β的生物合成而诱导近端小管上皮细胞发生转分化,参与糖尿病肾病的发生、发展.但AGEs是否通过TGF-β/Smad信号通路诱导糖尿病肾纤维化还不清楚.基于以上研究背景,该研究提出设想:AGEs可通过p38MAPK信号通路诱导肾小管上皮细胞合成TGF β 1;AGEs可激活Smad信号通路,促进肾小管上皮细胞发生转分化,参与糖尿病肾病的发生、发展.围绕这一假设,我们将进行以下研究:1.建立小鼠糖尿病肾病模型,检测AGEs在糖尿病小鼠体内的积聚及RAGE在糖尿病肾组织中的表达.2.探讨p38MAPK信号通路在糖尿病肾病肾组织中的表达和活化情况,对p38MAPK信号通路在AGEs诱导肾小管细胞表达TGF β 1的生物学过程中的地位和作用进行探讨.3.探讨Smad信号通路在糖尿病肾病肾组织中的表达和活化情况,对Smad信号通路在AGEs诱导的肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化过程中的作用进行探讨.