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目的:胃肠道恶性肿瘤已成为威胁人类健康和生存的重要原因。胃肠道恶性肿瘤如胃癌、食管癌、结肠癌等发病率呈明显的逐年上升趋势。Wnt/β-Catenin信号转导通路是细胞内参与生命体生理生化、病理等过程的关键通路,其与细胞的增殖、分化、转移、凋亡等过程密切相关。本论文初步探讨奥沙利铂联合地西他滨通过Wnt/β-Catenin信号通路抑制高分化胃癌细胞株MKN-28的作用机制。方法:胃癌细胞株MKN-28至培养良好后随机分为五组:对照组(n=6)、奥沙利铂组(n=6)、地西他滨组(n=6)、奥沙利铂联合地西他滨组(n=6)、Wnt/β-Catenin信号通路抑制剂XAV-939组(n=6)。待各组细胞生长良好后进行相应的处理4小时:对照组细胞给予DMSO(浓度3%)处理,奥沙利铂组给予奥沙利铂(10mg/L,100μL)处理,地西他滨组细胞给予地西他滨(20mg/L,100μL)处理;奥沙利铂联合地西他滨组给予二者处理(二者浓度分别为10mg/L和20mg/L,100μL),抑制剂XAV-939组给予XAV-939(10mg/L,100μL)处理。MTT法分析各组细胞的增殖抑制情况,DAPI染色法分析各组细胞的凋亡情况,Real-time PCR法分析细胞凋亡蛋白caspsae3及caspase6的表达变化,Western Blotting法和免疫细胞化学法分析Wnt/β-Catenin信号通路Wnt蛋白和β-Catenin蛋白的变化。结果:与对照组相比,奥沙利铂组、地西他滨组、联合组和XAV-939组细胞在1h、2h和4h的细胞抑制率明显升高,且差异存在显著的统计学价值(P<0.05);同时与奥沙利铂组、地西他滨组和XAV-939组细胞相比,联合组细胞在1h、2h和4h的细胞抑制率明显升高,且存在显著的统计学差异(P<0.05);DAPI染色分析细胞的凋亡形态时发现与对照组细胞相比,其余四组细胞的凋亡小体数量明显增多,且联合组细胞的凋亡小体数量最多;与对照组细胞相比,其余四组细胞的细胞凋亡相关蛋白caspase 3和caspase 6的mRNA水平明显增强(P<0.05),且联合组细胞的上述蛋白表达最强(P<0.05);与对照组细胞相比,其余四组细胞的Wnt和β-Catenin蛋白水平明显降低(P<0.05),且联合组细胞的上述蛋白表达降低最明显(P<0.05);Wnt和β-Catenin蛋白主要定位在细胞浆中,与对照组细胞相比,其余四组细胞的Wnt和β-Catenin蛋白水平明显降低(荧光强度),且联合组细胞的上述蛋白表达降低最明显(荧光强度)。结论:1.奥沙利铂联合地西他滨能明显抑制胃腺癌细胞株MKN-28的增殖,诱导其凋亡,且呈时间依赖性。2.奥沙利铂联合地西他滨抑制胃癌细胞作用可能与提高凋亡蛋白caspase3和caspase6蛋白的表达、抑制Wnt/β-Catenin信号通路蛋白表达有关。