【摘 要】
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烟草野火病菌分泌的烟毒素,对许多植物和细菌均有毒害作用,但烟草野火病菌自身却不受烟毒素影响.来源于烟草野火病菌的抗烟毒素蛋白(TRC)可以使烟毒素失活,从而保护自身免受
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烟草野火病菌分泌的烟毒素,对许多植物和细菌均有毒害作用,但烟草野火病菌自身却不受烟毒素影响.来源于烟草野火病菌的抗烟毒素蛋白(TRC)可以使烟毒素失活,从而保护自身免受其毒害.该研究在成功地克隆出抗烟毒素蛋白基因(trc),并在大肠杆菌中获得高效表达的基础上,纯化出抗烟毒素蛋白,测定了该蛋白的基本理化性质和活性,进而研究了蛋白构象变化与活力的关系,为阐明该蛋白中与分解烟毒素相关的功能区域及关键氨基酸残基提供了依据.通过优化诱导条件(37℃、2mM IPTG,5h)与纯化流程,在非失活条件下经亲和层析一步成功获得SDS-PAGE上单一的蛋白.测定了抗烟毒素蛋白基本动力学参数,其最适温度为26℃,与植物生理温度一致;最适pH值为pH7.5.上述结果将丰富人们对抗烟毒素蛋白的认识.
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