本论文开展了SARS-CoV特有基因ORF9b的研究，揭示了其在细胞中的定位模式。　　 第一章：文献综述。概括介绍了SARS-CoV的基因组结构组成及复制周期，对SARS冠状病毒所编码的主要结构蛋白，包括复制酶蛋白以及特有蛋白的分子生物学作了介绍。并对本论文的研究内容和意义进行了介绍。　　 第二章：SARS-CoV ORF9b的原核表达、抗体制备和生物信息学分析。将SARS-CoV ORF9b编码区克隆至原核表达载体pGEX-KG。经IPTG诱导，9b蛋白在大肠杆菌中获得了高效表达，将表达产物纯化，免疫家兔制备了SARS-CoV9b的抗血清。并对ORF9b进行了生物信息学分析，结果显示存在两种潜在的可能影响其亚细胞定位的分选信号：酪氨酸依赖的分选信号Yxxφ和核输出信号(NES)。　　 第三章：SARS-CoV ORF9b的细胞定位研究。通过构建ORF9b融合绿色荧光蛋白的真核表达载体并瞬时转染不同的哺乳动物细胞，利用激光共聚焦显微镜以及活细胞荧光观察检测9b在细胞内的分布情况。结果表明9b主要定位在细胞质中，且有均匀分布，核周围堆积以及形成小泡样结构等三中不同的表现形式。进而利用基因定点突变技术对9b内部潜在的酪氨酸依赖的分选信号进行了突变分析，结果表明第43位的酪氨酸和第46位的异亮氨酸的突变对9b的细胞分布有一定的影响。最后，还利用缺失突变以及丙氨酸定点突变的方法对9b内部潜在的核输出信号进行了分析，结果表明第49位和第55位的亮氨酸在指导9b的核输出上起着重要的作用。　　 第四章：SARS-CoV ORF9b和ORF7a的共定位研究。通过构建绿色荧光蛋白标记的7a和红色荧光蛋白标记的9b，瞬时转染不同的哺乳动物细胞后在激光共聚焦显微镜下观察两种特有蛋白的荧光分布情况。结果显示当7a或者9b在细胞内单独表达时主要在核周围聚积，并可以在细胞质中形成不连续的小泡样结构。当7a和9b在细胞内共表达时，两者的细胞分布模式并没有发生明显的改变，并且在部分细胞中可以看到两者的共定位现象。结果暗示着9b可能与7a定位在不同的亚细胞器上，并且两者在分选途径中可能发生相互作用。