本文对半夏生药学、化学成分、药理活性及毒性的研究进展作一综述，为后续研究提供参考；对不同变异类型半夏的鸟苷含量、HPLC指纹图谱、ISSR指纹图谱进行研究，为进一步选育优良种质、引种及规范化种植提供依据。本实验主要得到以下结果： 1．鸟苷含量的测定 采用反相高效液相色谱法，以甲醇—水—醋酸(5：95：0.01)为流动相，检测波长254nm，柱温为25℃，流速1.0ml/min，对半夏不同栽培类型中鸟苷的含量进行测定，含量在0.0114～0.155％之间，其中单叶半夏中鸟苷含量最高，为0.155％，其次是双珠芽半夏，为0.150％。该方法可用于半夏药材中鸟苷的含量测定。 2．HPLC指纹图谱的研究 建立了半夏不同栽培类型高效液相色谱指纹图谱的研究方法。确定了指纹图潜的测定条件，色谱柱：cosmosilODS(4.6mm×250 mm，5μm)；流动相：A色谱甲醇，B纯水；线性梯度洗脱：0.01-5 min100％B，5-15 min100％-97％B，15-25 min97％-95％B；流速：1.0 ml/min；检测波长：54 nm；柱温：25℃；进样量：20μL。通过分析指纹图潜，确定了11个峰为半夏药材指纹图谱的共有峰，构成该药材特有的色谱指纹图谱特征，以4号峰为参照物，对其他色谱峰的相对保留时间和相对峰面积进行计算，作为技术参数评价指纹图谱。通过对指纹图谱共有峰数据进行聚类分析，可以将不同变异类型半夏进行判别分类。HPLC指纹图谱可以用于较全面地考察半夏药材的质量。 3．ISSR指纹图谱的研究 (1)半夏ISSR反应体系的建立 采用改良CTAB法提取半夏基因组DNA，经A260和A280比值的测定，以及电泳检测和PCR扩增，表明改良CTAB法所提取的DNA在纯度、完整性都较好。建市了半夏最佳ISSR反应体系：25μL反应体系中含2.5μL10×buffer、2.0 mmol/L，MgCl2、0.4mmol/L dNTPs、25ng模板DNA、0.5U Taq DNA聚合酶。最佳反应程序：94℃预变性5 min，94℃变性50s，41℃-51.2℃(退火温度随引物不同而定)50s，72℃延伸1.5 min，循环39次，72℃最后延伸5min，4℃保存。 (2)半夏种质资源遗传多样性分析 从50条ISSR引物中筛选出扩增条带清晰，稳定性好的5条引物。共扩增出41个位点，平均每个引物扩增出8条，DNA片段大小分布在0.2-3.0kb之间。不同引物扩增的多态性也存在较大的差异，扩增的多态性条带数的范围为3-12条，每个引物检测到的多态位点平均为6个。各半夏品种的遗传相似性分析表明，各基因型问的相似系数在0.8760-0.9532之间。通过非加权算术平均数聚类(UPGMA)法，绘制了遗传关系树状图。以0.606为阈值将5份材料分为2类，这与传统分类学划分结果基本一致。ISSR分析结果显示，各半夏样品遗传多样性丰富，可以利用ISSR对半夏进行分子水平的鉴定和遗传多样性的分析。