【摘 要】
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合成了编码蜘蛛拖摈牵丝蛋白部分序列的基因单元片段,加倍至1200bp后与GFP基因融合,在大肠杆菌中和昆虫细胞中表达,表达产物具有同GFP一样的荧光性质.而后,将长度为2400bp的
【机 构】
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中国科学院上海生物化学和细胞生物学研究所
【出 处】
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中国科学院上海生物化学研究所 中国科学院上海生物化学和细胞生物学研究所 中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学
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合成了编码蜘蛛拖摈牵丝蛋白部分序列的基因单元片段,加倍至1200bp后与GFP基因融合,在大肠杆菌中和昆虫细胞中表达,表达产物具有同GFP一样的荧光性质.而后,将长度为2400bp的人工拖牵丝基因和GFP基因融合,两侧装配家蚕丝心蛋白重链基因5和3端序列,用电穿孔方法导入蚕卵.蚕卵孵化、发育和结茧后,紫外灯下筛选到了"亮茧".对"亮茧"蚕的后代进行鉴定.另外,分别将GFP基因插入在家蚕丝心蛋白轻链基因外显子2、3之间,和外显子6、7之间,其后代中都可观察到"亮茧"的出现.基因鉴定说明GFP基因存在于家蚕基因组中并可遗传;PCR证实存在预期的同源重组事件.实现了对丝心蛋白轻链基因进行的基因改造.分别得到了杂合体的转基因家蚕GFP-L23和GFP-L67.通过以上工作,建立了较完整的获得转基因家蚕的策略,发展耵庆的检测技术.
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