热休克蛋白对大鼠牙髓细胞高温损伤的影响

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目的:通过预热处理诱导热休克蛋白(heat shock protein,HSP),包括HSP70和HSP27,观察热休克蛋白对受高温损伤的大鼠牙髓细胞的影响。  方法:将年轻大鼠牙髓提取的原代大鼠牙髓细胞传代培养后,用生长旺盛的第3代牙髓细胞进行实验。将大鼠牙髓细胞随机分为4组,分别为正常对照组(C组):37℃常规培养18h;预热处理组(PH组):37℃常规培养9h后42℃培养1h,再复温至37℃常规培养8h;高温损伤组(SH组):37℃常规培养9h后46℃培养1h,再复温至37℃常规培养8h;预热处理+高温损伤组(PH+SH组):42℃培养1h后复温至37℃常规培养8h,再置于46℃培养1h后复温至37℃常规培养8h。采用Western Blot检测细胞内HSP70和HSP27的表达变化;并以四唑盐(MTT)比色法、吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)双染法、细胞形态学观察来评价细胞存活能力。  结果:Western Blot结果显示,与C组比较PH组HSP70和HSP27表达水平明显增加(P<0.01),与PH组比较PH+SH组细胞内HSP70和HSP27表达水平无显著变化(P>0.05);MTT比色法、AO/EB双染法和细胞形态学观察结果均显示,与C组比较PH组细胞存活率无显著变化、SH组和PH+SH组细胞存活率下降,与SH组比较PH+SH组的细胞存活率上升。  结论:预热处理可诱导大鼠牙髓细胞中的HSP70和HSP27表达上调;HSP70和HSP27表达增加能减轻高温对牙髓细胞的损伤。
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