水稻是世界上最重要的粮食作物之一，也是我国60％以上人口的主食。在我国，随着人口的不断增加和土地面积的减少，对于水稻产量增加的要求越来越迫切。因此，培育高产、优质水稻品种，不断提高水稻单产，是确保我国粮食安全的第一重任。　　叶片是水稻最重要的光合器官，据理论推算，水稻籽粒灌浆的60％-80％营养物质来自叶片的光合作用。因此水稻抽穗到灌浆期间，功能叶的过早衰老，将影响水稻灌浆速度，进而导致产量和品质下降。研究表明，若在水稻籽粒灌浆后期设法延长水稻功能叶片的寿命1天，稻谷产量可以增加1％-2％左右。因此，开展水稻叶片衰老相关研究对于揭示衰老的分子机理，培育抗衰老高产优质水稻品种具有重要的意义。本课题组利用60Co辐射诱变中籼品种自选1号，获得了一个隐性突变的叶片早衰及盐敏感突变体osles((o)ryza(s)ativa(l)eaf(e)arly-senescence and(s)alt-sensitive，osles)。利用图位克隆方法成功分离出了该基因(OsLES)，为进一步阐明叶片早衰的分子机制奠定基础。主要研究结果如下:　　1 osles突变体的表型及其主要农艺性状　　osles突变体从分蘖期开始叶片就出现早衰，主要表现为叶尖和叶边缘变黄，伴有红褐色斑点。与野生型相比，osles突变体的株高、有效穗、每穗粒数、千粒重、结实率、籽粒的宽度均显著降低，其中株高、每穗粒数和结实率下降最多。　　2 osles突变体的耐盐特性　　在100mmol L-1 NaCl胁迫下处理7天后，osles突变体叶片卷曲枯萎，而且植株高度和生物量显著下降。恢复生长5天后，有12.4％的突变体萎焉枯死，而且处理后的突变体生长速度明显慢于处理后的野生型对照。　　3 osles突变体的主要生理生化分析　　与野生型相比，突变体除倒1叶外，倒2叶和倒3叶在分蘖期的叶绿素含量均显著降低，而POD活性则在倒1叶、倒2叶和倒3叶中依次显著升高;突变体3片叶片的MDA含量均高于野生型15％左右。除倒1叶外，突变体的SOD活性均显著高于野生型。此外，突变体和野生型三片叶中的可溶性蛋白含量依次下降，但突变体的倒1和倒2叶中的可溶性蛋白含量显著高于野生型，而倒3叶则相反。　　4 osles突变体叶片的扫描和透射电镜观察　　扫描电镜结果显示，osles突变体抽穗期剑叶叶片上、下表面气孔数较野生型均明显增多，突变体下表面光滑无刺毛，野生型下表面粗糙有刺毛。透射电镜结果显示，与野生型相比，突变体抽穗期剑叶叶绿体发生皱缩，类囊体边缘模糊严重肿胀，出现大量解体现象，叶绿体内形成大量嗜锇颗粒。　　5 osles突变体的种子萌发　　种子萌发结果显示，在正常情况下野生型种子最终的发芽率比突变体高29％，而经100mM NaCl、200mM NaCl和10％ PEG6000、20％ PEG6000处理后，突变体种子的发芽率显著低于野生型，特别是在200mM NaCl和20％PEG6000处理下，突变体种子发芽率分别仅有4％和8％，分别比野生型降低了96％和70％。　　6 OsLES基因的定位　　遗传分析表明osles突变体表型受一隐性基因控制，借助图位克隆的手段，将该基因定位于水稻第6号染色体长臂上210kb物理距离范围内。经基因组测序发现，osles突变体中在210kb的候选区间内一注释基因LOC_Os06g45120（编码液泡H+-ATPase-A）的ORF区发生1个碱基(C)缺失造成移码突变。通过对定位群体F2中正常表型与早衰表型中该基因的重测序和酶切验证，证实在突变体中确实存在该碱基的缺失突变。