丹参酮ⅡA联合DAPT对UUO大鼠肾组织NICD、Hes-1和E-cadherin表达的影响

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目的:观察丹参酮ⅡA联合 N-[N-(3,5-二氟苯乙酰基)-L-丙氨酰]-2-苯基甘氨酸叔丁酯(DAPT)对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾组织Notch胞内域(NICD)、发状分裂相关增强子-1(Hes-1)、上皮型钙粘蛋白(E-cadherin)表达的影响,为中西医药物联合应用走进临床提供新的依据。  方法:30只雄性SPF级SD大鼠随机分为5组,每组6只:正常组,模型组,丹参酮ⅡA组,DAPT组,丹参酮ⅡA+DAPT组。除正常组外,各组结扎右侧输尿管,造成UUO模型。正常组和模型组予0.5%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)灌胃,其余各治疗组予相应药物灌胃14天。光镜下观察肾组织病理改变,免疫荧光法检测大鼠肾组织NICD蛋白的表达情况,并用免疫组化法检测大鼠肾组织Hes-1、E-cadherin蛋白表达情况。  结果:1.HE染色结果 正常组大鼠肾组织未发现病理损害,UUO组大鼠肾组织可见肾小管部分萎缩或扩张,间质纤维化明显,与模型组大鼠比较,其余各组HE评分均明显降低(P≤0.05)。各治疗组比较,丹参酮ⅡA组+DAPT组HE评分较丹参酮ⅡA组、DAPT组明显降低(P≤0.05)。  2. NICD免疫荧光检测结果 NICD 蛋白呈红色荧光,主要表达于肾小管上皮细胞的胞浆。正常组大鼠肾组织肾小管上皮细胞胞浆的荧光较弱(±);模型组大鼠肾小管上皮细胞胞浆的荧光明显增强(+++);与模型组比较,丹参酮ⅡA组、DAPT组及联合组的NICD 荧光明显减弱,其中以丹参酮ⅡA+DAPT组减弱较为明显(±), DAPT组次之(+),丹参酮ⅡA组较模型组略有减弱(++)。  3. Hes-1免疫组化检测结果与正常组比较,模型组、丹参酮ⅡA组大鼠肾组织Hes-1平均光密度值明显升高(P≤0.05),表明Hes-1在UUO大鼠肾组织沉积明显。与模型组比较,各治疗组大鼠肾组织Hes-1平均光密度值明显降低(P≤0.05),表明丹参酮ⅡA 联合DAPT可有效降低UUO大鼠肾组织Hes-1的表达;余治疗组比较,均无明显差异(P﹥0.05)。  4. E-cadherin免疫组化检测结果 与正常组比较,模型组大鼠肾组织E-cadherin平均光密度值显著低于正常组(P≤0.05),表明UUO大鼠肾组织E-cadherin阳性表达明显降低。与模型组比较,各治疗组大鼠肾组织E-cadherin平均光密度值明显升高( P≤0.05 );与丹参酮ⅡA+DAPT组比较,丹参酮ⅡA组、DAPT组大鼠肾组织E-cadherin平均光密度值降低(P≤0.05),表明丹参酮ⅡA 联合DAPT可有效升高UUO大鼠肾组织E-cadherin的表达;丹参酮ⅡA 与DAPT组比较,无明显差异(P﹥0.05)  结论:丹参酮ⅡA联合DAPT能在一定程度上改善 UUO 大鼠肾脏病理损伤,延缓慢性肾脏病进展,具有肾脏保护作用,其机制可能与减少NICD和Hes-1在肾组织的表达与沉积,并促进E-cadherin在大鼠肾组织的表达等作用有关。
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