猪圆环病毒2型(Porcinecircovimstype2，PCV2)是引发断奶仔猪多系统衰竭综合症(Postweaningmultisystemicwastingsyndrome,PMWS)的主要病原，给养猪业造成巨大损失。PCV2ORF2编码的结构蛋白具有型特异性抗原决定簇，因此它是区分PCVl和PCV2的重要抗原。本研究分别从重组的pMD-ORF2质粒和重组的pMD-ORFI+2质粒酶切获得了PCV20RF2和PCV20RFl+2基因，并分别将这两个基因插入真核表达载体pAdTrackCMV，构建了pAdTrackCMV-ORF2和pAdTrackCMV-ORFl+2重组质粒DNA疫苗。然后，分别用表达PCV2病毒衣壳蛋白的基因(ORF2)重组质粒pAdTrack-ORF2DNA疫苗、表达PCV2病毒聚合酶的基因(ORFl)重组质粒pAdTrack-ORFlDNA疫苗、ORFl和ORF2基因两者相加的重组质粒pAdTrack-ORFl+2DNA疫苗、壳聚糖佐剂包被的pAdTrack-ORF2DNA疫苗、壳聚糖佐剂包被的pAdTrack-ORFl+2DNA疫苗、以及脂质体佐剂包被的pAdTrack-ORF2DNA疫苗、脂质体佐剂包被的pAdTrack-ORFl+2DNA疫苗连续3次肌肉注射免疫小鼠。pAdTrack-ORF2、pAdTrack-ORFl+2DNA疫苗通过肌肉接种小鼠体内后，两者都能够诱导小鼠产生特异性抗体，疫苗免疫后28d小鼠血清的PCV2特异性抗体开始升高，42d时达到最高；pAdTrack-ORFlDNA疫苗可引起PCV2特异性抗体升高，但与空载体相比差异不显著；佐剂包被的DNA疫苗产生抗体更持久。与对照组相比，免疫组小鼠脾脏淋巴细胞对丝裂原刀豆蛋白A(ConA)的刺激反应的增殖显著增强，NK细胞非特异性杀伤活性明显提高。在这两方面，pAdTrack-ORF2与pAdTrack-ORFl+2DNA疫苗的免疫效果没有显著性差异；含有佐剂包被的DNA疫苗诱导小鼠脾脏淋巴细胞的增殖能力、NK非特异性杀伤活性高于没有包被的DNA疫苗；脂质体佐剂包被的DNA疫苗在诱导小鼠脾脏淋巴细胞NK非特异性杀伤活性方面显著优于壳聚糖包被的DNA疫苗。采用三色流式细胞术分析免疫小鼠脾脏淋巴细胞中各细胞亚群的比例，结果表明DNA疫苗pAdTrack-ORF2和pAdTrack-ORFl+2免疫可以引起小鼠脾脏淋巴细胞中CD3+CD4+CD8一亚群和CD3+CD4一CD8a+]I}群的相对含量增加，佐剂包被的DNA疫苗免疫效果更为显著，两种佐剂之间差异不显著。以上实验结果说明pAdTrack-ORF2和pAdTrack-ORFl+2DNA疫苗通过肌肉接种均能够诱导小鼠产生特异性抗体反应，引起脾淋巴细胞增殖反应和NK细胞杀伤活性加强，壳聚糖和脂质体作为佐剂可以提高免疫效果。