【摘 要】
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奶浆果树叶斑病是由可可毛色二孢菌（Lasiodiplodia theobromae）引起的奶浆果树叶片上的新病害,此病害尚未报道。作者于2019年9月在合肥市官亭镇发现一种未知的奶浆果树叶部病害,从发病奶浆果树病叶上分离获得4株菌株,通过形态学观察和分子鉴定,可将其分为尖孢镰孢菌（Fusarium oxysporum）和可可毛色二孢菌（Lasiodiplodia theobromae）。经过柯赫氏
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奶浆果树叶斑病是由可可毛色二孢菌（Lasiodiplodia theobromae）引起的奶浆果树叶片上的新病害,此病害尚未报道。作者于2019年9月在合肥市官亭镇发现一种未知的奶浆果树叶部病害,从发病奶浆果树病叶上分离获得4株菌株,通过形态学观察和分子鉴定,可将其分为尖孢镰孢菌（Fusarium oxysporum）和可可毛色二孢菌（Lasiodiplodia theobromae）。经过柯赫氏法则验证,明确奶浆果树叶斑病病原菌为可可毛色二孢菌。通过研究该病原菌的生物学特性并测定5种杀菌剂对该病原菌菌丝和孢子的抑制效果,为奶浆果树叶斑病的发生、流行及防控提供了参考依据。主要研究结果如下:1.病原菌的分离鉴定和致病性测定采用常规组织分离法纯化分离到病原菌,在PDA培养基上形成白色棉絮状菌落。菌落初期呈白色,随后颜色逐渐加深,后期转黑色,气生菌丝生长旺盛。分生孢子器半埋于培养基上,呈铅黑色球状或不规则形状。在显微镜观察下,分生孢子呈椭圆形或卵形,单孢,大小约为长21.5–31.5μm,宽13–17μm。分生孢子早期呈无色透明状,无隔膜,内有颗粒状物,后期逐渐变为深褐色,中央有一隔膜。对病原菌的核糖体内转录间隔区（Internal transcribed spacer,ITS）和编码延伸因子基因（Elongation factor-1 alpha,EF-1a）进行聚类分析,系统发育树显示,其和几株可可毛色二孢菌（MK460232、MK370843、MH447076和MK530011）分在同一支上且支持率为99%。结合形态学的观察和致病性测定,表明病原菌为可可毛色二孢菌（Lasiodiplodia theobromae）。2.奶浆果树可可毛色二孢菌的生物学特性本试验中测定了奶浆果树可可毛色二孢菌最适生长的光照、培养基、p H值、温度、菌丝致死温度,以及病原菌对碳、氮源的利用情况。结果表明:光照对奶浆果树可可毛色二孢菌菌丝生长无明显影响;奶浆果树可可毛色二孢菌最适生长培养基为PDA培养基;当p H值为5-7时,奶浆果树可可毛色二孢菌菌丝干重达到最大;奶浆果树可可毛色二孢菌在25-35℃范围内生长较好,最适温度为28℃;在54℃下水浴10min,不能生长;奶浆果树可可毛色二孢菌在以蔗糖为碳源的液体培养基中生长最好,菌丝干重最大;在以硝酸钠为氮源的液体培养基中生长最好,菌丝干重最大。3.杀菌剂对奶浆果树可可毛色二孢菌的毒力测定采用室内毒力测定的方法研究丙环唑、多菌灵、咪鲜胺、氟硅唑和戊唑醇5种杀菌剂对奶浆果树可可毛色二孢菌的抑制作用,结果表明:氟硅唑对病原菌菌丝的抑制效果最好,EC50值为1.0554μL/m L;其次是丙环唑和多菌灵,EC50值分别为1.3282μL/m L和1.8213μL/m L;咪鲜胺的抑菌效果较差,EC50值为5.6652μL/m L;戊唑醇的抑菌效果最差,EC50值为11.4610μL/m L。丙环唑对孢子萌发的抑制作用最为明显,孢子萌发率仅为32.93%,孢子萌发相对抑制率达到了67.07%;其次是氟硅唑,孢子萌发率为45.26%,孢子萌发相对抑制率为54.57%;多菌灵对孢子萌发的抑制作用一般,孢子萌发率为57.14%,孢子萌发相对抑制率为42.86%;咪鲜胺对孢子萌发的抑制作用较差,孢子萌发率为63.73%,孢子萌发相对抑制率为36.27%;戊唑醇对孢子萌发的抑制作用最差,孢子萌发率为72.06%,孢子萌发相对抑制率为27.94%。
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