【摘 要】
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目的：通过建立兔病毒性眼病感染模型,分析其血清中特异性糖蛋白抗原的抗体产生和变化情况,确认单纯疱疹病毒Ⅰ型感染时的主要糖蛋白免疫原;同时,对特异性糖蛋白D进行基因克隆
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目的：通过建立兔病毒性眼病感染模型,分析其血清中特异性糖蛋白抗原的抗体产生和变化情况,确认单纯疱疹病毒Ⅰ型感染时的主要糖蛋白免疫原;同时,对特异性糖蛋白D进行基因克隆及初步的原核表达,为建立单纯疱疹病毒Ⅰ型特异性诊断方法及进一步的抗原研究奠定基础.方法：病毒培养悬液接种兔眼,造成病毒性眼病,定期心脏采血,用免疫印迹法检测各个病程抗体变化情况.以病毒总DNA为模板经PCR扩增出糖蛋白D基因,与质粒载体pPROEX HTa连接后转入宿主菌E.coli DH5αk ,经重组质粒酶切鉴定后,将阳性克隆用IPTG诱导表达,转印至PVDF膜,用人单纯疱疹病毒Ⅰ型阳性多克隆血清进行印迹鉴定.结论：（1）在单纯疱疹病毒Ⅰ型感染过程中,糖蛋白C为主要免疫原,说明高分子量多肽具有较高的活性,且对机体的再感染有保护作用.（2）经原核表达的糖蛋白D为一分子量27KD的蛋白条带,具有免疫活性,能与多克降抗体发生抗原抗体反应,这对于今后建立单纯疱疹病毒Ⅰ型的特异性诊断方法及进一步的抗原研究具有一定的意义.
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