【摘 要】
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目的:探讨大鼠全脑缺血再灌注后神经细胞凋亡及其调控基因bcl-2和Bax的作用,并观察EGb761对其的影响,以初步探讨EGb761对脑缺血损伤保护的分子机制.方法:采用Pulsinelli四血
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目的:探讨大鼠全脑缺血再灌注后神经细胞凋亡及其调控基因bcl-2和Bax的作用,并观察EGb761对其的影响,以初步探讨EGb761对脑缺血损伤保护的分子机制.方法:采用Pulsinelli四血管闭塞法略作改动制备大鼠弥漫性全脑缺血模型.实验SD大鼠随机分为三组:(1)缺血再灌注组(IR组):电凝阻断大鼠双侧椎动脉,24h后夹闭双侧颈总动脉20分钟,造成大鼠全脑缺血.松开动脉夹即为再灌注,再灌注时间分为24小时、48小时、72小时.(2)假手术组(SOC组):除不阻断颈总动脉外,余手术操作同IR组.(3)EGb761预处理组(EGb组):术前用EGb761灌胃给药进行预处理,剂量为100mg/kg体重,连续7天,每日一次,手术操作同IR组.运用TUNEL法检测再灌注48小时的海马CA1区凋亡神经细胞,并通过透射电镜对该时间点神经细胞进行超微结构观察.采用免疫组化SP法和原位杂交方法对海马CA1区各再灌注时间点的Bax蛋白和bcl-2mRNA进行检测.经图像分析所得数据结果进行组间t检验,P<0.05认为差异有显著性.结论:细胞凋亡是大鼠全脑缺血后海马CA1区神经元丢失的重要原因;证实了bcl-2和Bax是参与神经细胞调亡的重要调控基因.EGb761对脑缺血再灌注后的神经细胞具有显著的保护作用,其机制可能与上调bcl-2基因和下调Bax蛋白表达,从而抑制神经细胞凋亡有关.
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