【摘 要】
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积雪草(Centella asiatica(L.)Urbaff)作为一种传统中药材,早在2000多年前的《神农本草经》里就有其入药的记载。在2010年版《中国药典》中记载:积雪草性寒,味苦、辛,具有清
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积雪草(Centella asiatica(L.)Urbaff)作为一种传统中药材,早在2000多年前的《神农本草经》里就有其入药的记载。在2010年版《中国药典》中记载:积雪草性寒,味苦、辛,具有清热利湿、解毒消肿之功效。临床上常用于治疗湿热黄疸,中暑腹泻,砂淋血淋,痈肿疮毒,跌扑损伤以及传染性肝炎,皮肤病,流行性脑脊髓膜炎等。
近些年来,国内外学者对积雪草中有效成分的研究主要集中在积雪草苷和羟基积雪草苷,而对其他有效成分的研究较少。本论文以积雪草为研究对象,采用常用的实验技术,如超声提取、HPLC分析鉴定、柱层析分离纯化、高效逆流色谱(HSCCC)分离纯化、MS及NMR结构鉴定、UV分光光度法酶含量测定以及MS/MS裂解规律研究等方法,主要研究建立积雪草中积雪草酸(Asiaticacid,AA)等活性成分的提取、分离纯化、鉴定及含量测定的方法,并评价其抑制脂肪酸合酶(fatty acid synthase,FAS)的活性,进而探讨积雪草有效成分作为FAS抑制剂在治疗肥胖症方面的应用价值。
本课题研究的目的是探索积雪草中积雪草酸等有效成分的提取及分离纯化的方法以及积雪草中有效成分对脂肪酸合酶抑制作用的研究。为此,我们就以下几个方面展开研究:
(1)优选积雪草有效成分的最佳提取工艺,建立HPLC测定积雪草酸的方法,并对70种中药中积雪草酸的含量进行测定。
(2)分别利用柱色谱技术和HSCCC技术从积雪草中分离纯化积雪草酸,并将柱色谱和高速逆流色谱联合应用,实现积雪草中积雪草酸的快速分离制备;
(3)建立了HSCCC分离纯化积雪草中其他有效成分的方法;
(4)采用紫外分光光度法测定积雪草有效成分抑制脂肪酸合酶的活性。通过测定样品抑制FAS作用的活性,评价积雪草有效成分对FAS的抑制作用,进而探讨积雪草有效成分作为FAS抑制剂在治疗肥胖症方面的潜在应用价值。
(5)采用MS/MS技术,研究羟基积雪草酸的ESI.MS裂解特征,推测裂解机制,为其在体内代谢及生物转化的研究提供实验依据。
期望本课题的研究结果将为研发高效低毒的天然减肥药物提供实验方法和理论依据。
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