论文部分内容阅读
脊椎动物胚胎的早期发育是一个非常复杂的过程。在胚胎发育的原肠作用时期，同时存在的诱导事件和细胞运动对其胚轴的形成是至关重要的。汇聚延伸运动是这一时期的一种重要推动力，包括腹侧中内胚层细胞向背部中线的汇聚运动和轴向中内胚层细胞极化并沿前后轴延长的延伸运动。近年来，microRNA在调节细胞功能以及胚胎发育过程中的研究已经成为热点，但是其在汇聚延伸运动中的作用却未有报道。因此，本文以斑马鱼为模式动物，研究microRNA在原肠作用时期汇聚延伸运动过程中的作用。 本研究发现，母源表达的斑马鱼基因microRNA-206(mir206)在原肠作用时期的表达水平逐渐上升。在斑马鱼胚胎中过量表达mir206或敲低mir206基因的表达都会特异性地导致胚胎前后末端之间的角度增加，脊索标记基因ntl(notail)、脊索前板标记基因hggl(ctsllb)和外胚层标记基因dlx3b(distal-lesshomeoboxgene3b)的表达量均没有明显变化，但表达图式都呈现出沿前后轴变短、左右轴变宽的趋势，表明汇聚延伸运动出现严重缺陷。进一步的研究表明，mir206是通过细胞自主性和非细胞自主性两种方式来影响汇聚延伸运动的。在斑马鱼胚胎中过量表达或敲低mir206基因，都使细胞膜突触的形成和F-actin聚集显著下降，从而影响细胞运动。通过生物信息学分析和体内、体外实验，我们证明mir206靶向pricklela。遗传互作实验证明mir206靶向pricklela，调节JNK2磷酸化，进而影响斑马鱼的汇聚延伸运动。 本研究首次证明mir206是斑马鱼体轴建立过程中汇聚延伸运动所必须的。它直接靶向非经典Wnt信号通路中的关键组分pricklela，调节MAPKJNK信号，影响胚胎早期发育过程中的细胞运动。 此外，本研究还发现，mir206在初级造血和血管生成中也发挥一定的作用，过量表达和敲低mir206都会造成血细胞减少和血管发育异常。