TCCF对抗小鼠CCl<,4>急性肝损伤的作用及其保护机制的研究

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肝脏疾病是当前最严重的健康问题之一。我国每年死于肝相关疾病者有50万之多,对健康构成了巨大的威胁。但至今尚缺少低毒、高效的治疗药物。 榄仁(Terminalia catappa L.) 为使君子科诃子属植物,广泛分布于热带和亚热带地区。在台湾、印度及东南亚地区民间盛行使用其落叶治疗肝脏疾病。研究显示榄仁叶有护肝作用,但其有效部位及其作用机制尚未阐明。长期以来,对榄仁叶药理学研究一直集中在鞣质,而对其他成分的研究甚少。 本文运用四氯化碳 (carbon tetrachloride,CCl<,4>) 诱导的小鼠急性化学性肝损伤模型,观察榄仁叶醇提物氯仿萃取部位 (the chloroform fraction from the ethanol extract of T.catappa leaves,TCCF) 抗肝损伤的能力,发现 TCCF 能明显对抗 CCl<,4> 诱导的小鼠血清丙氨酸氨基转移酶 (alanine aminotransferase,ALT) 和天冬氨酸氨基转移酶 (aspartateaminotransferase,AST) 及肝组织丙二醛 (malondialdehyde,MDA) 含量的升高,显著改善 CCl<,4> 损伤小鼠的肝组织结构,且随着剂量的增加,阻断肝损伤的能力增强,即具有保护肝细胞的作用。在此基础上,采用荧光分光光度计检测方法,发现 CCl<,4>损伤组小鼠肝脏的线粒体内钙浓度升高,而 TCCF 可以剂量依赖性地预防此种变化,表明 TCCF 可通过调节线粒体中游离钙的浓度,维持线粒体钙稳念发挥保护线粒体、预防肝损伤的作用。 采用 RT-PCR,Western Blot 及免疫组化等方法,检测 TCCF 对 CCl<,4>诱导的肝脏细胞因子白细胞介素6 (interleukin 6,IL-6) 过度表达的影响,探讨 TCCF 的作用机制来研究药物对抗肝损伤的机制。结果发现 TCCF 可从转录和翻译水平有效阻断 CCl<,4> 诱导的肝脏 IL-6 mRNA和蛋白水平的升高。 另外,本文观察了FCCF的两种有效成分乌苏酸(ursoliC acid,UA)和亚细亚酸(asiatic acid,AA)对自由基的清除能力,以进一步探讨TCCF的作用机制。采用羟自由基和超氧阴离子发生系统,发现UA、AA均有较强的清除羟自由基和超氧阴离子、抗氧化的能力,且AA的作用强于UA。 综上所述,不同剂量的TCCF均具有良好的护肝作用,且其护肝作用可能与维持线粒体钙稳态保护线粒体、抑制IL-6过量表达及其有效成分UA及AA的清除自由基作用有关。为开发保肝药物和临床应用提供了实验依据。
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