无花果拟盘多毛孢（Pestalotiopsis fici）CGMCC3.15140是一株分离自健康茶树枝条的植物内生真菌。天然产物化学研究表明它能够产生多种结构独特、生物活性广泛的次级代谢产物，其中包括具有良好的抗肿瘤活性的新结构代谢产物chloropupukeananin。由于在发酵过程中，pestheic acid和iso-A82775C能够与chloropupukeananin一同分离获得，而被推测为chloropupukeananin生物合成的前体物质。在研究pestheic acid生物合成途径的过程中，我们发现其生物合成基因簇中含有两个可能漆酶编码基因，ptaE和ptaK。通过对ptaE的体内敲除实验推测其有可能负责将二苯酮氧化偶联形成pestheic acid，但是并没有相关的体外酶活反应作为依据。对于ptaK的体内敲除实验则发现其并不影响pestheic acid的产生。有学者指出pestheic acid需要先氧化偶联形成maldoxin，maldoxin再与iso-A82775C反应形成chloropupukeananin。但是P.fici能否产生maldoxin尚未有相关的报道，对于maldoxin的生物合成也缺乏相关的研究。本课题对P.fici的发酵产物进行了化学分离工作，最终分离得到maldoxin。随后我们构建了带有His标签的ptaE和ptaK的回补株，并从其中分别表达纯化了PtaE和PtaK蛋白，通过对发酵产物进行HPLC分析，对蛋白进行体外酶活反应检测，从体内和体外两个方面研究了ptaE和ptaK的功能。　　黄曲霉因可以产生强致癌性物质黄曲霉毒素而备受关注。黄曲霉毒素是一类聚酮化合物，与pestheic acid结构相似。比较pestheic acid和黄曲霉毒素的生物合成途径发现，二者拥有相似的主骨架合成过程以及不同的后修饰，因而具有利用这两个代谢途径开展组合生物合成的天然优势。为了开展上述的工作，需要建立黄曲霉的高效遗传转化体系。本实验利用根癌农杆菌介导的转化方法成功构建了黄曲霉的遗传转化体系，并采用正交实验探索了转化的最适条件。