青藏高原高寒草甸钝裂银莲花居群遗传多样性及其与生态因子的相关研究

来源 :兰州理工大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:hyz012
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钝裂银莲花(Anemone obtusiloba)是一种青藏高原东缘高寒草甸中比较常见的毒杂草,花色从白色过渡到黄色,为牲畜不食。本文采用RAPD基因组DNA分子标记技术对甘南州不同花色的11个居群进行遗传多样分析,并将遗传多样性与样地的生态因子进行相关性分析。实验结果表明:  1.合作、碌曲、玛曲和阿孜4个样地的土壤水分含量有显著性差异(P<0.05),大小顺序如下:玛曲>碌曲>阿孜>合作;4个样地的土壤皆呈现中性偏酸性,但碌曲样地土壤的pH显著低于其他三个样地(P<0.05);土壤速效磷含量极高,之间没有显著性差异;全磷含量极高,玛曲和阿孜样地土壤全磷含量显著高于合作和碌曲的(P<0.05);有效氮含量极高,但样地之间存在显著性差异(P<0.05),大小顺序为:阿孜>玛曲,碌曲>合作;4个样地的速效钾含量水平均较高,阿孜、玛曲和碌曲的样地土壤速效钾含量之间有显著性差异(P<0.05),合作的和碌曲的之间也有显著性差异(P<0.05),合作的与阿孜、玛曲的之间没有显著性差异,大小顺序如下:阿孜>玛曲>碌曲,合作>碌曲。  2.采用正交试验和单因素试验相结合的方法确定了RAPD-PCR最优反应体系和扩增程序:总体系20μL,DNA模板30ng,primer0.4mmol/L,Taq DNA聚合酶0.5U,dNTPs0.4mmol/L,10×Buffer2μL,Mg2+2.5mmol/L,ddH2O14μL;预变性96℃5min30sec,变性94℃1min10sec,退火37℃1min40sec延伸72℃1min10sec,续补72℃6min30sec,循环数40。  3.玛曲黄色(MQY)居群的多态位点百分率最高,相对地,玛曲白色(MQW)居群的最低,各地域白色居群多态位点均低于黄色和浅色居群的。总体多态位点百分率高于各亚居群(MQY除外)。各亚居群Shannon信息指数和 Nei’s指数估计的基因多样性大小顺序和多态位点百分率的顺序基本一致。钝裂银莲花的遗传变异主要发生在种群内,但亚居群间已发生一定的遗传分化。钝裂银莲花11个亚居群可以归为3大支,第一支是合作钝裂银莲花;第二支是碌曲黄、浅和白色居群,玛曲黄色和浅色居群;第三支是阿孜黄、浅色居群和玛曲白色居群。  4.通过钝裂银莲花居群遗传多样性与生态因子相关性分析发现,海拔越低,土壤营养成分含量越低,钝裂银莲花居群遗传多样性越高;土壤含水量、速效氮(AN)含量在钝裂银莲花的地理分布中可能起着一定的作用。
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