棉铃虫复眼眼色突变的遗传研究

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棉铃虫(Helicoverpa armigera)是鳞翅目铃夜蛾属重要的农业害虫之一,其高度的杂食性,强大的繁殖力以及分布的广泛性严重威胁着农作物的产量,是农业虫害防治的难点。  实验室在棉铃虫饲养过程中筛选到一种可稳定遗传的复眼眼色突变体。与野生型相比,该突变体在幼虫体色和成虫眼色都表现出明显差异。目前对于棉铃虫等夜行性昆虫复眼眼色的突变很少有报告,其具体的色素种类、合成代谢途径及分子机制更是鲜有研究。  本论文结合生态学与分子生物学的研究方法,试图定位克隆棉铃虫眼色突变体基因,并将该基因作为一种报告基因应用于鳞翅目的昆虫改造,同时也为探索夜行性昆虫相关色素代谢通路奠定基础。  通过对棉铃虫成虫复眼眼色突变的遗传分析确定了棉铃虫复眼眼色突变是发生在位于常染色体上单基因控制的隐性突变。通过系统比较棉铃虫野生型和突变体生长发育及交配生殖的相关指标,发现突变体与野生型在蛹重、幼虫和蛹的发育历期上,并没有显著差异。野生型和突变体的交配成功率和受精率也没有显著差异。  对棉铃虫的野生型和突变体两个品系的杂交和回交代进行了的扩增片段多态性研究,使用60个EcoRI和MseI的引物组合共得到28个具1∶1分离比的条带,绘制出该突变基因所在的连锁群,得到4个距离突变基因较近的分子标记。将得到的分子标记进行回收测序,BLAST对比得到6个匹配的基因序列,设计引物扩增,但因扩增条带的序列在GenBank中是大量重复序列而无法进行进一步的扩增得到全长。  进而对野生型与突变体两个品系进行cDNA的AFLP多态性分析,共得到了13个具有1∶1分离比的分子标记,为进一步得到基因的全长奠定了坚实的基础。
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