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目的:了解环境内分泌干扰因子邻苯二甲酸二乙基已酯(Ethylhexylphthalate,DEHP)及代谢产物邻苯二酸-单-2-乙基己酯(single-ethylhexylphthalate,MEHP)对幼鼠精原细胞有否损害。
方法:生后2周龄的Wistar雄性幼鼠96只,随机分8组,每组12只。随机选择1组行生理盐水(0.9％NS0.2ml·kg-1.d-1,喂养3周)灌胃,作为正常对照组(NC组);再选1组行环磷酰胺(CTX100mg·kg-1.d-1,喂养1周)灌胃,作为阳性对照组(PC组);余各组分别用DEHP、MEHP按低剂量(100mg·kg-1.d-1,喂养3周)、中剂量(200mg·kg-1d-1,喂养2周)、高剂量(300mg·kg-1d-1,喂养1周)灌胃制作动物模型。观察不同时期、不同剂量下睾丸精原细胞的变化,并应用TUNEL法检查精原细胞凋亡,免疫组化法检测睾丸组织中c-kit、PI3K的表达,放射免疫法检测血清性激素(卵泡刺激素FSH、黄体生成素LH以及睾酮T)水平。
结果:(1)、睾丸精原细胞的变化:用药组精原细胞萎缩、发育落后,数量少、线粒体肿胀、空泡化等,但在用药的高剂量组短时间内损害与低剂量组长时间的损害一致;
(2)、睾丸组织中精原细胞凋亡:与NC组比较,用药组精原细胞凋亡显著增多(P＜0.01),但在高剂量短时间喂养组与低剂量长时间喂养组间比较,差异无统计学意义(P＞0.05);
(3)、睾丸组织中c-kit、PI3K的表达:与NC组比较,用药组睾丸组织中c-kit及其下游信号分子PI3K的表达显著减少(P＜0.01),但高剂量短时间喂养组与低剂量长时间喂养组间比较,差异也无统计学意义(P＞0.05);
(4)、血清性激素水平:与NC组比较,用药组FSH、LH水平升高,IT水平下降(P＜0.05);但用药的高剂量组与低剂量组间比较差异无统计学意义(P＞0.05)。
结论:DEHP及代谢产物MEHP对幼鼠精原细胞有明显损害,推测可能对小儿的生精功能也有损害,小儿应避免过多的接触DEHP及代谢产物MEHP的物质。