【摘 要】
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核酸是重要的生命物质,是遗传信息的携带者和基因表达的物质基础,它支配蛋白质的合成,是主宰人体的生长、发育、繁殖、变异和遗传的重要生命现象。随着现代分子生物学和分子生物
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核酸是重要的生命物质,是遗传信息的携带者和基因表达的物质基础,它支配蛋白质的合成,是主宰人体的生长、发育、繁殖、变异和遗传的重要生命现象。随着现代分子生物学和分子生物技术的发展,关于核酸的研究以及核酸代谢产物与各类物质相互作用的研究已经成为研究核酸的一个重要领域。
荧光分析法具有高灵敏度、高选择性、方法简便等优点,在生物分析中得到较广泛的应用,使其越来越成为鉴定和测定药物的重要手段。近年来,荧光分析法在分析上的应用日趋广泛,发展迅速,在分析领域中有广泛的应用前景。
核酸水解产物本身的荧光极其微弱,不能利用荧光技术直接研究其性质、结构以及进行定量测定。因此,本文以提高灵敏度为主要出发点,采用荧光猝灭法间接测定了腺嘌呤,尿嘧啶,胸腺嘧啶,次黄嘌呤等核酸水解产物并对其测定机理进行了研究,另外研究了用1,3-环己二酮-甲醛体系作为荧光衍生试剂与腺嘌呤生成强荧光物质的方法测定腺嘌呤。
第一章综述了核酸水解产物的性质与应用,荧光分析法的应用及展望。
第二章至第五章分别根据腺嘌呤,尿嘧啶,胸腺嘧啶,次黄嘌呤对伊文思蓝荧光的猝灭作用,建立了用荧光猝灭法测定腺嘌呤,尿嘧啶,胸腺嘧啶,次黄嘌呤的分析方法。利用Stern-Volmer图及伊文思蓝荧光寿命的测定研究了腺嘌呤,尿嘧啶,胸腺嘧啶,次黄嘌呤猝灭伊文思蓝(Evansblue)的猝灭类型。利用log[(Fo-F)/F]与log[Q]的关系求出了伊文思蓝与腺嘌呤,尿嘧啶,胸腺嘧啶,次黄嘌呤的形成常数,实验了pH值、干扰离子、放置时间、核酸水解产物等对测定的影响,该方法简便,快速,检出限低,可用于合成样品中腺嘌呤,尿嘧啶,胸腺嘧啶,次黄嘌呤的测定,与高效液相色谱法方法对照,结果满意。
第六章研究了1,3-环己二酮-甲醛体系作为荧光衍生试剂测定腺嘌呤的方法。腺嘌呤与1,3-环己二酮-甲醛反应生成一种强荧光物质。该产物的最大激发波长是394nm,最大发射波长是453nm。腺嘌呤的浓度与荧光强度成良好线性关系,从而对腺嘌呤进行了分析测定。实验了pH值、干扰离子、产物稳定性、核酸水解产物等对测定的影响,该法操作简单,检出限低,线性范围宽,可用于合成样品中腺嘌呤的测定。
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