拟南芥ANNEXIN蛋白家庭族的亚细胞定位及ANN4和ANN6的过表达研究

来源 :四川农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:szjlq
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
Annexins,即膜联蛋白,是一类钙离子及磷脂结合蛋白。动物细胞中膜联蛋白参与囊泡运输、胞吐、钙离子通道形成、信号转导、细胞分化等。在植物细胞中膜联蛋白可以参与植物细胞的分泌、胞吐、钙离子代谢、离子通道建立等一系列膜性活动。植物膜联蛋白还能够调节一些较为复杂的生理过程如植物抗寒、耐盐、抗旱等,在植物缓解活性氧伤害和调节细胞液中自由钙离子的含量方面也扮演重要角色。  本实验室在筛选广谱抗病基因RPW8.1增强子突变体的过程中,发现一个拟南芥膜联蛋白基因对RPW8.1的功能具有负调控作用,而拟南芥膜联蛋白家族有8基因,即NN1、ANN、ANN、ANN、ANN、NN6、ANN7、ANN8。目前对ANN1和ANN4的功能比较明确,而对该家族其他成员的生物学功能还不清楚,也没有关于拟南芥膜联蛋白亚细胞定位的相关报道。因此,本论文采用融合荧光蛋白定位技术和本生烟瞬时表达系统,对拟南芥八个膜联蛋白开展了亚细胞定位研究,同时也完成了水稻的两个膜联蛋白OsANN和OsANNP35的定位。我们还通过转基因技术进一步研究了拟南芥ANN1、ANN4、ANN6、ANN8和水稻OsANN在拟南芥中的亚细胞定位。综合亚细胞定位实验结果,我们发现拟南芥大多数膜联蛋白(ANN1、ANN2、ANN3、ANN7、ANN8)是定位于细胞质呈现完整的细胞轮廓,特别像是绑定在细胞膜上,而且它们还围绕着细胞核形成ER(Endoplasmic reticulum,内质网)环,ANN5-eYFP在细胞质和细胞核都有定位,ANN4-eYFP和ANN6-eYFP表现为独特定位方式(ANN4-eYFP丝条状局部聚集,ANN6-eYFP局部点状沉积)。可见,拟南芥膜联蛋白亚细胞定位具有多样性,这与它们功能的多样性是相辅相成的。  实验过程中,我们加入了核定为信号以辅助观察。有趣的是,我们发现ANN4和ANN6在本生烟中会延缓核定位信号的定位。我们又对ANN4和ANN6进行了过表达研究,同时比较了ANN4和ANN6过表达前后的亚细胞定位情况,结果发现过表达ANN4-eYFP和ANN6-eYFP后其细胞定位结果有所差异,表现为很明显的ANN4-eYFP丝条状局部聚集和ANN6-eYFP的点状沉积。我们对拟南芥35S∷ANN4-eYFP和35S∷ANN6-e YFP做了抗病性鉴定,结果显示接种白粉菌后35S∷ANN6-e YFP叶片上孢子萌发率和菌丝长度显著高于野生型,说明过表达ANN6-eYFP增加了拟南芥对白粉菌的易感性。  通过本论文的研究,我们发现拟南芥膜联蛋白家族成员具有丰富的亚细胞定位类型,暗示它们在拟南芥生命活动中行使多种多样的功能。本研究还发现拟南芥膜联蛋白的新功能,如可能参与细胞内吞过程、干扰核定位信号、与植物抗病性相关等,这些结果为全面揭示膜联蛋白家族在拟南芥中的生物学功能奠定了重要基础。
其他文献
松材线虫病是一种重要的林业病害,向来有“松树的癌症”的称号,对松树的危害十分严重,它的病原是松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)。它是包括日、韩、美、加拿大、墨西
创业不易。很多成功人士,都面临过创业失败的局面,他们有的人重新振作起来,最终又获得了成功。而有的人,则从此一蹶不振,失败到底。本期增设创富英雄一栏,从央视《致富经》栏
亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis(Guenée)是危害玉米造成减产和引起品质下降的主要害虫之一。转基因抗虫玉米为其治理提供了简单有效的防治措施。靶标害虫的抗性治理是转基因
苦瓜(Momordica charantia L.)是我国广泛种植的一种蔬菜作物,在其生长过程中表现出较强的抗虫性。本文以美洲斑潜蝇、小菜蛾、斜纹夜蛾和黄曲条跳甲等为供试昆虫,研究了苦瓜对
期刊
近年来,随着社会主义市场经济体制的建立和企业改革的进一步深化,决定了思想政治工作只能加强,不能削弱。党建工作是完成业务工作的思想组织保证,而落实党建工作责任制又是抓
以具有农药和医药活性的α-氨基烷基膦酸酯、氰基丙烯酸酯和喹唑啉等三类新化合物为研究对象,引入氟原子或杂环,进行抗烟草花叶病毒和抑制蛋白磷酸化活性研究,进行农药和医药
甜瓜是一种重要的葫芦科农作物,它是世界十大名贵水果之一,被同本誉为"水果皇后",多年来一直是我国的出口创汇产品.但是甜瓜的抗逆性和抗病性都很差,尤其近几年,保护地的种植
该研究以烟粉虱Bemisia tabaci的利它素源物质为研究对象,包括蜜露及其主要糖份,烟粉虱若虫、成虫和虫蜕的提取物等,研究各利它素源物质对烟粉虱两种主要寄生蜂——桨角蚜小
野生稻是一种宝贵的自然资源,它是栽培稻的祖先,野生稻在长期的野生状态中,经受了各种灾害和不良环境的自然选择分化,产生了不同程度的抗逆性,保持了有利于种群繁衍的各种遗