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目的:观察低温复合黄芩素甙对脑缺血后大鼠海马CA1区神经元GluR2及其Mrna表达的影响,以期在分子生物学水平探讨低温和黄芩素甙脑保护作用的机制以及两者有无协同作用。
方法:采用SD大鼠四血管阻断法制作大鼠全脑缺血再灌注模型。SD大鼠45只,体重250～300g,随机分成5组:假手术组(5只)、对照组、黄芩素甙组、低温组、低温复合黄芩素甙组,后四组再分别分为2d和4d两个亚组,每个亚组5只动物。黄芩素甙组及低温复合黄芩素甙组在缺血前30min给予黄芩素甙45mg/kg腹腔注射,其余各组在相应时间点给予等容量生理盐水。对照组、黄芩素甙组、低温组、低温复合黄芩素甙组动物被实施双侧椎动脉电凝,24h后阻断双侧颈动脉10min。假手术组不夹闭双侧颈总动脉,其余同手术组。手术期间假手术组、对照组、黄芩素甙组动物维持体温在37±0.5℃,直到完全清醒;低温组及低温复合黄芩素甙组动物维持体温在32±0.5℃至缺血后6h。于再灌注后2d和4d麻醉、断头处死动物并分离海马CA1区,用Western blotting和RT-PCR技术测定GluR2蛋白及其mRNA条带和内参条带的灰度比值。
结果:对照组GluR2蛋白及其Mrna的狄度比值较假手术组明显降低(P＜0.01),黄芩素甙组、低温组明显高于对照组(P＜0.01),低温复合黄芩素甙组高于黄芩素甙组及低温组(P＜0.01)。脑缺血后2d,低温和黄芩素甙对GluR2蛋白及其Mrna均有轻微的协同作用,但均无统计学意义(P＞0.05)。脑缺血后4d,低温和黄芩素甙在抑制GluR2蛋白下调方面具有明显协同作用且有统计学意义(P＜0.05);而在抑制GluR2 mRNA下调方面仅有轻微的协同作用,但无统计学意义(P＞0.05)。
结论:低温和黄芩素甙都能抑制脑缺血后海CA1区神经元GluR2蛋白及其mRNA的下调,且两者合用优于单用。