红笛鲷胸腺、头肾、脾脏个体发育及ANAE<'+>T、IgM<'+>细胞分布及变化规律的研究

来源 :广东海洋大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hzsbf
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近年来,鱼类免疫系统的形态和功能的研究日益受到重视,尤其是三个主要的淋巴器官:胸腺、头肾和脾脏。牙鲆(Paralichthysolivaceus L.)、斜带石斑鱼(Epi nepheluscoioide)、大菱鲆(turbot Scophthalmus maximus)等多种鱼类苗种成活率极低,与其早期淋巴器官尚未完全发育成熟有密切关系;另外,在成鱼的养殖过程中,病害问题也是严重影响了水产品的产量和质量,而疾病控制过程中大量药物的使用,则在一定程度上会引发食品安全问题,进而影响人类的健康。多年的研究表明,利用渔用疫苗防治水产动物疾病,具有明显优势,然而高效疫苗的应用是建立在宿主有效免疫应答基础上,这就要求我们必须对鱼类的免疫器官,特别是三个主要的淋巴器官的结构、功能、发育以及调控等进行深入研究。目前,国内外的学者对鱼类主要淋巴器官的个体发育过程、器官结构、免疫细胞等都进行了多方面的研究。此外,对鱼类主要淋巴器官的研究也可体现出低等脊椎动物免疫系统向高等脊椎动物免疫系统进化的过程。 红笛鲷Hunphead snapper(Lutjanus sanguineus Cuvier)俗称红鱼、大红鱼等,隶属鲈形目、笛鲷科、笛鲷属,是重要的海产经济鱼类之一,也是目前海水网箱养殖业引进的优良新品种,具有较高的经济效益。 本论文首次通过冰冻切片ANAE组化和ABC免疫组化方法对鱼类淋巴器官ANAE<+> T细胞和IgM<+>细胞分布情况以及12个月内这两种重要淋巴细胞数量变化进行了研究,并分析了ANAE<+>T细胞和IgM<+>细胞12个月内细胞数量变化与年龄、鱼体重,胸腺、头肾、脾脏器官重量的关系。也是首次研究了红笛鲷主要淋巴器官个体早期发育组织学变化以及12个月红笛鲷生长情况的变化。最终是为了阐明、探讨鱼类淋巴器官早期发育组织学变化情况,了解鱼类免疫活性建立的时间,及淋巴器官发育相对滞后与鱼苗的低成活率之间的关系;对淋巴器官中淋巴细胞进行定位,进而了解淋巴器官在疾病防御过程中如何发挥作用。此外,也体现低等脊椎动物免疫系统向高等脊椎动物免疫系统进化的过程。 研究结果表明:一、红笛鲷出膜后第1天前肾出现,在第18天,胸腺和头肾间出现细胞桥,同时头肾淋巴化。脾脏原基在出膜后第8天出现,但到第22天才偶尔观察到淋巴细胞,之前主要是红血细胞发育。胸腺是最后一个出现的淋巴器官,它的原基在出膜后第12天出现,但其发育很快,第15天就出现淋巴细胞。胸腺、头肾、脾脏原基出现和淋巴化的顺序与其他大部分海水鱼类相似。红笛鲷淋巴器官发育功能完善相对滞后可能是其苗种成活率低的原因。 二、胸腺清楚分成四区:外区、皮质区(中区)、髓质区(内区)、内下区,皮质区内具有大量的小淋巴细胞及少量胸腺小体;髓质区包括大量的网状上皮细胞和大胸腺细胞;内下区的血管以及淋巴细胞等丰富;外区细胞种类很多,如黏液样细胞。脾脏主要由网状结缔组织和淋巴组织构成;红白髓能基本区分,具有黑色素巨噬细胞中心、椭圆体。头肾由具有肾小球和肾小管的泌尿器官逐渐发育为具有淋巴细胞、粒细胞、肾上和肾间细胞的淋巴-造血-分泌器官,主要由淋巴细胞聚集区域、粒细胞聚集区域、内分泌区域三部分组成。胸腺小体、胸腺血胸屏障出现,红白髓能基本区分,肾上细胞和肾间组织的位置接近等都是红笛鲷做为高等硬骨鱼类,比其他低等的鱼类在淋巴器官上进化的地方,也表现出了脊椎动物淋巴器官的进化趋势。 三、三个淋巴器官皆有IgM<+>细胞、ANAE<+>T细胞。其中胸腺皮质区IgM<+>细胞数量最多,其次是头肾、胸腺的髓质区、脾脏。而ANAE<+>T细胞以脾脏中数量最多,其次是头肾、胸腺的髓质区、胸腺皮质区。ANAE<+>T细胞在三个器官中多呈均匀分布,而IgM<+>细胞在血管、胸腺小体、黑色素巨嗜细胞中心等的外周呈密集分布。实验证明了红笛鲷胸腺中的T细胞多为不成熟的T细胞;此外,还含有大量的IgM<+>细胞。而脾脏、头肾内的ANAE<+>T细胞多于胸腺,因而认为胸腺成熟的T淋巴细胞迁移到头肾和脾脏。 四、通过研究得知,红笛鲷年龄与体长及体重间都存在线性关系,其中体长与年龄的关系更为密切。脾脏、胸腺、头肾重量都随着年龄和体重的的增长而增长,但与体重的线性关系较密切;其中胸腺、头肾重量与体重的关系最为显著。脾脏、胸腺、头肾中都存在ANAE<+>T细胞、IgM<+>细胞,只有脾脏ANAE<+>T细胞、IgM<+>细胞数量和头肾IgM<+>细胞数量与年龄成明显的线性关系,其他与年龄不呈或呈很弱的线性关系。同时脾脏中ANAE<+>T细胞、IgM<+>细胞数量与脾脏的重量呈显著线性关系,头肾中IgM<+>细胞数量与头肾重量呈较明显线性关系;而胸腺中ANAE<+>T细胞、IgM<+>细胞数量,头肾中ANAE<+>T细胞数量,与各自的重量呈弱的或不呈线性关系
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