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目的：体外建立OPTN(E50K)突变转基因细胞模型，研究OPTN(E50K)突变对p-CREB调控BDNF表达的影响在RGC-5凋亡机制中的作用。 方法：将携带有OPTNwt与OPTNE50K真核表达载体瞬时转染到RGC-5细胞，流式细胞仪检测OPTNwt与OPTNE50K过表达对RGC-5凋亡的影响，real-time PCR定量分析RGC-5细胞内源性BDNF mRaNA表达水平，Western blotting检测野生型optineurin蛋白和E50K突变optineurin蛋白对RGC-5细胞P-CREB和BDNF蛋白的表达影响，细胞免疫荧光共聚焦显微镜观察optineurin蛋白和BDNF蛋白在RGC-5细胞中的定位情况。 结果：OPTNwt和OPTNE50K基因引起细胞凋亡的总数在转染后24h开始呈现出明显差异，与OPTNwt基因相比，OPTNE50K基因突变使RGC-5凋亡显著增多；OPTNwt在RGC-5细胞中过表达，可以使内源性BDNF mRNA表达上调，随时间而增加；而OPTNE50K的过表达，可以使RGC-5细胞中BDNF mRNA下调，在各个观察时间点BDNF mRNA的表达一直持续维持低水平；野生型optineurin蛋白可以使p-CREB在转染36h后表达上调，使BDNF蛋白的表达在转染后48h上调，略滞后于p-CREB，也滞后于BDNF mRNA的表达。细胞免疫荧光显示野生型optineruin和E50K突变optineruin主要都分布在RGC-5的细胞质中，围绕在细胞核周围，而在凋亡RGC-5细胞中，野生型optinernin可以转移入细胞核，而E50K突变optineruin主要仍在细胞质中，未能进入细胞核。 结论：细胞模型中，OPTNwt和OPTNE50K过表达对RGC-5凋亡存在不同影响，OPTNE50K使RGC-5凋亡细胞总数明显增多，推测OPTNwt可能在RGC-5存活生长中促进内源性BDNF mRNA的表达，对RGC-5起到保护性作用，而OPTNE50K则阻碍了BDNF mRNA的正常表达，加速了RGC-5凋亡过程；野生型optineruin可能通过向细胞核内的转移，直接或者间接的激活与转录密切相关的p-CREB，进而增进内源性BDNF的转录，促进表达上调；E50K突变的optineruin无法进入发生凋亡的细胞核，失去对BDNF转录表达的调控能力，使RGC-5抗凋亡刺激能力降低，走向凋亡。